四. 基因工程技术在改进微生物2.pptVIP

四. 基因工程技术在改进微生物菌种方面的应用 (一) 提高次级代谢产物的产量 1. 增加限速酶的基因拷贝数 异青霉素N合成酶对P.chrysogenum青霉素产量的影响 增加IPNS基因提高青霉素产量 例2. 头孢菌素C生物合成的限速酶 增加限速酶基因提高头孢菌素C产量 增加限速酶的其它例子-3: 增加限速酶的其它例子-4: 2.增加正调节基因, 去除负调节基因 调节基因在次级代谢产物合成中的作用 去除负调节基因使结构基因超量表达 3.增加抗性基因的拷贝数 增加抗性基因拷贝提高抗生素的产量 卡那霉素6’-乙酰转移酶[AAC（6’）] 的作用 增加抗性基因拷贝提高抗生素的产量-2 例一: 阿维菌素产生菌的基因改造 阿维菌素“B”组分转化成“A”组分的分子基础 阿维菌素C5位的甲基化 1.用基因工程手段灭活C5-氧甲基转移酶基因 Disruption plasmid of aveD gene 双交换菌株（阻断变株）的挑选 发酵产物的HPLC分析 D24-1组分的质谱分析 2. 只产Avermectin “2”组分基因工程菌的构建 aveC基因在染色体上的位置 重组质粒的构建 重组质粒的转化 Gene replacement (基因置换） 遗传型的改变 基因工程菌AveC-9发酵产物的HPLC分析 例二. 黑暗链霉菌的基因改造 黑暗链霉菌（S.tenebrarius）菌株U-13