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- 2017-08-20 发布于北京
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贝类种质基因组DNA保存 基因组DNA含有物种个体的遗传信息,可用于构建基因组文库、分离所需的基因和检测相关的分子标记等。由于基因组DNA所含的遗传信息量大,易获得和保存,是目前种质资源收集和保存的主要内容之一。 程序图 基因组DNA收集 ——→ 测定——→ 保存 一、基因组DNA的收集 利用各种方法(包括传统的基因组DNA提取方法、各种商品化的基因组DNA提取试剂盒)提取贝类基因组DNA 二、测定 对收集的基因组DNA进行纯度、浓度、完整性的测定 紫外分光光度法检测DNA纯度 取一定量的样品DNA,稀释50倍,用分光光度计分别测定A250、A280的值。根据A250/A280之比值判断DNA纯度。 基因组DNA完整性的测定 琼脂糖凝胶电泳检测基因组DNA完整性 采用0.4 % 琼脂糖凝胶电泳,以标准DNA分子标记对比, 检测基因组DNA的完整性,以碱基数(kb)表示。 基因组DNA的定量 对于浓度大于0.25 μg/mL的DNA溶液,采用紫外分光光度法测定:在波长260 nm紫外线下,1OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50 μg/mL。 对于浓度小于0.25 μg/mL的DNA溶液,也可采用荧光光度法:DNA样品与溴化乙锭(EB)结合后,在紫外线照射下激发荧光,其荧光强度与核酸含量成正比。使用一系列已知的
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