参杞合剂抗肿瘤的实验分析.pdfVIP

参杞合剂抗肿瘤的实验研究 硕士研究生： 李红拮 指导教师： 范晓磊教授 指导小组： 张卓然教授 黄敏教授 专业名称： 病原生物学 摘 要 陬肿瘤的致死率在人类各类疾病当中占据首位。治疗肿瘤的 方法很多，其中中医药在肿瘤治疗方面有其独到之处。传统中药复方 舍剂“参杞片”具有健脾益气、滋阴补血之功效，能够改善机体免疫 功能，但其抑瘤作用尚不明显。参杞合剂(SQ)是在此基础上辅以黄 芪、当归、莪术、白花蛇舌草煎制而成，旨在充分发挥中药复方协同 作用的优势，增强疗效。本实验初步探讨其抑瘤作用及作用机制，为 今后开发具有多种功能的抗瘤新药提供理论依据。 r 右腋皮下荷瘤，荷瘤后随机分为3组，生理盐水(NS)对照组，环磷 酰胺(CY)组，参杞合剂(SQ)治疗组，每组8只。荷瘤后24小时， 只，每日一次，连续十日；CY组则腹腔注射CY(O。4mg,／d)，方法及 次数同上。停药后24小时处死全部小鼠，取瘤组织称重。取部分瘤组 织用中性福尔马林固定，制备病理切片；另一部分剪碎制备成肿瘤细 胞悬液，应用流式细胞仪做细胞周期分析。同时取脾测NK细胞杀伤 活性；取腹腔渗出液，测M伞细胞杀伤活性；收集血清测m．12、TNF．a 含量。研究参杞合剂(SQ)对荷瘤小鼠的抑瘤作用及机制。 将体外培养的HcaFl6A3(H22)细胞株，加入不同浓度的参杞合剂 (0．0625～19．生药／m1)，培养不同时间后MTT法计算抑瘤率。将SQ (0．06252．生药／mI)加入H22细胞中，不同时间后取一部分用流式细胞 仪检测细胞周期和凋亡率；另一部分倒置显微镜下观察形态学改变， 然后用戊二醛固定，制备电镜标本观察其超微结构变化。研究参杞合 剂(SQ)对体外H：2细胞株的抑瘤作用及机制。 结果： 1．参杞合剂(SQ)能够延长荷瘤小鼠生存期，抑制肿瘤生长； 增强荷瘤小鼠免疫功能；影响肿瘤细胞增殖周期。SQ能显著延长荷瘤 小鼠的生存时间：SQ组荷瘤小鼠存活期平均为53．61：1：7．42天，较NS 对照组(20 72-1-2．31天)有显著延长(Po．01)。SQ能抑制肿瘤生长， 抑瘤率达65．68％，CY组抑瘤率为4576％，与NS组比较均有显著性 差异(PO．05)；SQ组与CY组抑瘤率有显著性差异(P005)，SQ组 抑瘤效果强于CY组。SQ能增强荷瘤小鼠免疫功能：SQ能增强荷瘤 78± 小鼠的NK／MqD细胞杀伤活性。SQ组的NK细胞杀伤活性为55 细胞杀伤活性为57 23±1．37％，较NS组(38．57±1 15％)明显增强 (P0．05)。SQ能增强荷瘤小鼠细胞因子活性：SQ组的IL．12含量为 34±l (76．27±2．34pg／m1)，较NS组(51 94pg／mI)有明显增加 (PO．05)。SQ组的TNF-n含量为99 37 86±2．77pg／ml，较NS组(80 3．19pg／ml，较NS组有明显降低(Po．05)。 SQ能影响肿瘤细胞增殖 3．14％)明显降低(pO．05)；S期比率(54．61±2 53％)较NS组(27．51 2 ±l 00±o．00％)较NS组 43％)明显升高(P0．05)，G2／M期比率(o (312±0