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膀胱癌移行细胞系双向电泳技术的建立 靳胜许华林张敏张曼· (北京世纪坛医院) 【摘要】背景与目的：膀胱癌是泌尿系统中最常见的肿瘤，多数为移行上皮细胞癌，具有增 长迅速、早期转移等特点。目前公开的数据库中尚未见到膀胱移行上皮癌双向电泳参考图谱 及其蛋白表达谱。本研究目的是建立高分辨率的移行上皮癌细胞PUMC双向凝胶电泳图谱， 并初步分析其蛋白质表达情况。方法：用固相PH梯度双向凝胶电泳技术分离膀胱移行上 Calibrated 皮癌细胞PUMC细胞总蛋白，凝胶考马斯亮蓝染色，然后利用GS-800 DQue s t2 Densitometer凝胶成像系统获取图像，用P D分析软件对图像进行背景消减、 斑点检测、匹配、斑点位置重复性的系统分析。结果：获得了背景清晰、分辨率和重复性较 好的双向凝胶电泳图谱，三块胶平均蛋白质点数为6464-16，匹配点数为5074-12，匹配率 达76％，三块胶蛋白质点在位置上有较好的重复性，不同胶间蛋白质点在IEF方向偏差是 (O．964-0．27)mill，SDS．PAGE方向偏差是(1．214-0．24)mill。结论：建立了膀胱癌移行 上皮癌细胞PUMC的双向电泳检测方法，为进一步构建其蛋白质表达数据库以及研究膀胱 移行上皮癌的蛋白表达图谱，并在此基础上进行与正常组织的差异蛋白显示比较，为肿瘤标 志蛋白的筛选打下方法学基础。 【关键词】双向电泳；膀胱移行上皮癌：蛋白质组 cell Establishmentand ofHumanbladdercarcinomafine Analysis proteomeby Two-Dimensional xuhualin Eiectrophoresis’Jinshengzhangminzhangman。 This was toestablishand thetwo-dimensional [Abstract]Objectivedesigned optimize study the ofhumanbladdercarcinomacelllinePUMC． gelelectrophoresis(2-DE)forproteomeanalysis MethodsAseriesof as methods，Such electrophoresis samplepreparation parameters、gel concentration 2DE usedto humanbladder 、PDQuestanalysissoftware，wereanalysis carcinomacelllinePUMC．ResultsandConclusionsThe 2DE good patternincluding resolutionand Wasobtained．AftercoomassieBrilliantBlueR-250 reproducibility staining，the 2D