不同前负荷条件下去神经平滑肌的应力松弛与膜电流特征.docVIP

不同前负荷条件下去神经平滑肌的应力松弛与膜电流特征 倪志展1，李洁垚1，张 培1，夏 莉1，2，叶思琪1，2，Annie Christel Bell1，2，樊守艳3，朴伶华3，陈志斌1，高凌峰2，3，王 杨2，3 (1海南医学院临床学院，海南省海口市 570102；2海南医学院特殊环境生理学实验室，海南省海口市 571101；3海南医学院生理学教研室，海南省海口市 571101) 引用本文：倪志展，李洁垚，张培，夏莉，叶思琪，Annie Christel Bell，樊守艳，朴伶华，陈志斌，高凌峰，王杨. 不同前负荷条件下去神经平滑肌的应力松弛与膜电流特征[J].中国组织工程研究，2016，20(24):3588-3594. DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.24.014 ORCID: 0000-0002-4512-1821(倪志展) 文章快速阅读： 文题释义： 被动张力：肌丝标本受牵拉而引起的回缩现象。被动张力与肌丝标本的结构蛋白以及肌细胞外基质成分的关系更为密切；不同程度牵拉，即受负荷程度的不同会导致回缩曲线的不同；不同离子浓度环境下的回缩特性也有所不同。 细胞膜电流：肌细胞膜电位反映了肌丝标本兴奋性的变化，使用膜片钳技术可观察及记录到不同负荷状态下的肌丝膜电位变化；不同离子环境下肌丝，膜电位变化也有所不同，特别是钙离子浓度对牵拉肌丝膜电流变化影响尤为显著。 摘要 背景：肌丝牵拉实验是检验去神经后的肌丝标本在不同受力负荷状态下的肌肉自身力学变化的实验方法。 目的：探讨不同前负荷平滑肌组织在肌动图上产生的自主性舒缩波形特点以及自主性舒缩时的膜电流特点。 方法：平滑肌肌丝取自昆明小鼠主动脉平滑肌层及膀胱壁肌层。肌丝标本松弛状态下在任氏液中稳定 5 min后将两端固定，微量步进定位器调整标本长度，使前负荷至1 g。以此作为标本初长度(L0)。微量器快速牵拉标本1次(L0+1)即低前负荷，每间隔5min快速牵拉标本1次，第10次为高负荷(L0+10)，在快速牵拉前滴加3%CaCl2及0.05% Nitrendipine干预，观察L0+1及L0+10后标本的自主舒缩。制备2 μm玻璃微电极，显微镜下贴附平滑肌组织并高阻封接，测量L0+1及L0+10两种前负荷后应力松弛时间相的膜电位变化。 结果与结论：①平滑肌标本应力松弛期随前负荷上升而变短，且膀胱平滑肌张力松弛期短于主动脉平滑肌，显示两种组织在顺应性上存在差异；②应力松弛期自主舒缩幅度随前负荷的增加而加大；③主动脉平滑肌膜电流波动随前负荷的增加而显著；④高钙环境显著提高了主动脉平滑肌膜电流的幅度及频率，这可被L-型钙通道阻断剂(0.05% Nitrendipine)抑制而减弱；⑤结果提示，前负荷的增长会引起应力松弛期肌源性自主收缩加强，这种顺应性变化与机械性牵拉引起的跨膜离子流动有关。高负荷状态下的高 钙环境引起平滑肌膜电流的加强，这种变化可被L-型钙通道阻断剂所抑制。从而说明快速牵拉不仅直接作用于平滑肌机械门控通道，同时也影响到L-型钙通道的激活。 关键词： 组织构建；组织工程；去神经平滑肌；快速牵拉；高负荷状态；自主性舒缩；膜电流 主题词： 肌，平滑；去神经支配；应力，物理 基金资助： 2013年海南省高等学校科学研究项目(Hjkj2013-33)；2014年海南省大学生创新创业训练计划项目HYCX2014073) Preload-induced stress relaxation and membrane current changes in the denervated intact smooth muscle Ni Zhi-zhan1, Li Jie-yao1, Zhang Pei1, Xia Li1, 2, Ye Si-qi1, 2, Annie Christel Bell1, 2, Fan Shou-yan3, Piao Ling-hua3, Chen Zhi-bin1, Gao Ling-feng2, 3, Wang Yang2, 3 (1School of Clinical Medicine, Hainan Medical University, Haikou 571102, Hainan Province, China; 2Laboratory of Offshore Medical Physiology, Hainan Medical University, Haikou 571101, Hainan Province, China; 3Department of Medical Physiology, Hainan Medical University, Haik