RNA干扰抑制survivin基因诱导前列腺癌细胞凋亡的实验分析.pdf

RNA干扰抑制survivin基凶诱导前列腺癌细胞凋亡的实验研究 RNA干扰抑制survivin基因诱导前列 腺癌细胞凋亡的实验研究 中文提要 la的构建负载双片段survivinshRNA的RNA十扰质粒载体，JE转染人 雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC一3，研究其对PC一3细胞 和细胞凋亡的影响。 再分别提取两种质粒，特异性酶切后回收、连接、转化、克隆， 构建负载2条survivinshRNA的RNA干扰重组体质粒载体。提取 质粒酶切鉴定、测序分析。人雄激素非依赖性前列腺癌PC一3细 胞株常规培养。质粒载体采用阳离子脂质体试剂Metafectene共转 染PC．3细胞，同时设立阴性序列载体转染对照组和空白对照组。 转染48小时后分别收集各组细胞。行RT-PCR、Western blotting、 细胞记数、AllnexiP。V与PI双染色法凋亡分析等检测。 shRNA的RNA干扰 结果酶切鉴定、测序分析证实负载双片段survivin 重组体质粒载体构建成功。转染PC。3细胞48小时后，重组体质 粒转染组、阴性序列载体转染对照组、空白对照组survivin基因 RNA十扰抑制survivin基吲诱导前列腺癌细胞捌亡的实验研究 中文挺要 两对照组相比差异均有显著性意义bO．05)，而两对照组间比较差 异无显著性意义0O．05)。细胞生长曲线示PC一3细胞增殖明显受 抑制。 shRNA的RNA干扰质粒载体构建成功。共转 结论 负载双片段survivin 抑制PC．3细胞增殖、诱导PC-3细胞凋亡。 关键词survivin；短发夹状RNA；RNA干扰：前列腺癌：凋亡 作 者：杨光天 指导教师：单玉喜 II 兰盟叁±垫!她!竺!!塑薹堕堕型塑生型些型立塑壅壁型塑 鉴兰丝些 Inductionof ProstateCancer Cellswith Apoptosis RNA Interference Survivin InhibitingExpression Abstract Toconstructthe twosurvivinshort Objective plasmidsencoding hairpin on itseffects Hormone RNA(shRNA)and investigate ProstateCancerline —Refractory celts PC一3．