Humanin通过抑制一氧化氮发挥神经保护作用.pdfVIP

· 742 · 中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(4)：742—745 [文章编号] 1000—4718(2012)04—0742—04 Humanin通过抑制一氧化氮发挥神经保护作用：}： 宋海岩△， 邓晓慧， 苗莹莹 (新乡医学院人体解剖学教研室，河南 新乡453003) [摘 要] 目的：探讨 humanin(HN)拮抗 Ⅳ一甲基一D一天冬氨酸 (NMDA)诱导的兴奋性神经毒的作用及 其可能的作用机制。方法：原代培养sD新生大鼠皮层神经元，免疫荧光检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)，细胞 随机分为正常组、NMDA组、内皮型一氧化氮合酶抑制剂 (L—NAME)组及HN组，分别采用MTI法、一氧化氮 (NO)浓度测定、Hoechst染色及Westernblotting检测各组细胞中细胞活性、NO浓度、细胞凋亡状况及磷酸化p38丝 裂原活化蛋白激酶(P—p38MAPK)的表达。结果：免疫荧光显示90％细胞为NSE阳性细胞，L—NAME组与HN 组细胞活性均低于正常组而高于NMDA组，NO浓度、细胞凋亡数 目及P—p38MAPK的表达均高于正常组而低于 NMDA组 ；L—NAME组与HN组相比，细胞活性降低，细胞凋亡数 目及P—p38MAPK的表达升高。结论：HN可部 分通过抑制NO产生和p38MAPK的激活而减少神经元的凋亡，从而发挥神经保护作用。 [关键词] 一氧化氮；Humanin；N一甲基一D一天冬氨酸；兴奋性神经毒性 ；细胞凋亡；神经元 [中图分类号] R363 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．04．030 Humaninprotectsneuronsbyinhibitingnitricoxide SONG Hai—yan，DENG Xiao—hui，MIAO Ying—ying (DepartmentofHumanAnatomy，XinxiangMedicalUnivemity，Xinxiang453003，China．E—mail：shy80825@yahoo．corn． cn) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheeffectandmechanismofhumanin(HN)oninhibitionofexcitatoryneurotoxicity inducedbyN—methyl—D—asparate(NMDA)．METHODS：CorticalneuronsfromnewbornSDratwereprimarilycul- tured．Thepurityofhtecellswasassessedbyimmunofluorescencetechnique．Theneuronswererandomlydividedintonor— malgroup，NMDAgroup，Ⅳ 一nitro—L—argininemethylester(L—NAME)groupandHNrgoup．Theactivityofthe neuronswasdetectedbyMT?assay．Nitricoxide(NO)concentrationwasdetectedbyNOdetectionkit，andtheneuronal apoptosiswasexaminedbyHoechststaining．TheexpressionofP—p38MAPKintheneuronsWas determinedbyWestern blotting．RESULTS：Immunofluorescencetestshowedthat90％cellswereneuron—specificenolase(NSE)一positivestai— ningceils．TheactivityoftheneuronsinL—NAME rgoupnadHN groupWas lowerthanthatinnomr alrgoup，buthigher thanthatinNMDA rgoup．NO concentration，hten