FP Assay--药物筛检技术的前哨站.PDF

FP Assay--藥物篩檢技術的前 哨站 謝嚴蔚 撰 在 實 驗 室 裡， 為 觀 察 兩 個 物 質(例 如 藥 物 與 蛋 白質 或 核 酸)之 間 的 結 合 情 形?或 是 否 作 用?常 會 以 兩 種 不 同 的 螢 光 分 子 分 別 連 接 於 待 測 物 質 上， 藉 由觀 察 兩 種 螢 光 訊 號 的 差 異(或 比 例)， 判 斷分 子 間作 用 的情 形(如F R ET A s s ay ，需 考 慮 不 同螢 光 分 子 的性 質， 且 實 驗 操 作 過 程 較 為 困 難)。 自19 2 6年 開始，P e r r i n首創F l uo re s c e nc e P o la r iz at io n (暫譯 為偏 極 化 螢 光 )偵 測 技 術 ， 快 速 且 大 量 分 析 生 物 分 子 間作 用 的實 驗， 變 得 不 再 只 是 想 像 而 已 。 F P As s ay 近 年 常運 用 於 藥 物 篩 檢 的實 驗， 其 優 點 在 於：1 . 節省 材 料 成 本， 僅 需 要 一個 螢 光 分 子；2 .實驗 簡 單， 過 程 不 需 清 洗；3 .快速 且 高 通 量 分 析， 可 利 用 微 量 孔 盤， 一次 施 做 大 量 樣 品， 實 驗 花 費 的 時 間短；4 .儀器 成 本 低， 不 需 用 晶片( M ic ro a r ray )掃 描 分 析 。 美 國B io T e k公 司 精 心 設 計 的盤 式 分 析 儀- - - Sy ne rgy 2 ，搭 載 高 靈 敏 度F P偵測 系 統， 精 緻 的濾 鏡 系 統 ， 大 幅 提 升 靈 敏 度 。搭 載 兩 種 不 同 的 光 源(X e no n F la s h / T u ng st e n la m p)，更 可 彈 性 應 用 於 不 同 的 螢 光 分 子(註)。 高 通 量 的 判 讀 能 力， 讓Sy ne rgy 2可 判 讀6 ~ 15 3 6孔 盤 ， 甚 至 能 判 讀 一般 的石 英 管 以 及 超 微 量( 2 μl)的 樣 品， 提 升 了醫 藥 開發 與 生 醫 研 究 的經 濟 價 值 。 何謂偏極化螢光？ 光 是 沒 有 方 向性 的 。一般 生 活 中常見 的光， 如 日光 燈 、太 陽等 是 沒 有 方 向性 的； 而 光 若 有 固 定 的 方 向， 或 說 有 方 向性 的光， 則 被 稱 為 極 化 光 或 偏 光， 如 雷射 或是L C D螢幕 的光 是 有 方 向性 的光 。另外， 如 果 透 過 濾 片， 亦 可 固定 光 的 方 向性， 如 某 些 偏 光 太 陽 眼鏡 等 。(如圖 一) 圖一 、光的方向性 。1.一般的光線沒有方向性; 　　　　　　　　　 2 .雷射光是有方向的; 　　　　　　　　　 3 .經過特殊的鏡片可 固定光的方向性 。 F l uo re s c e nc e P o la r iz at io n ( F P)是 一種 藉 由 固定 光 的 方 向， 觀 察 蛋 白質 之 間作 用 的情 形， 或 做 為 新 藥 開 發 的 螢 光 偵 測 方 式 。換 句 話 說， 實 驗 者 只 需 標 定 螢 光 分 子(f l uo re s c e i n)在 待 測 物 上(如 藥 物 或 某 個 蛋 白質)， 即 可 直 接 觀 察 物 質 間是 否 作 用(結 合) ? (如 圖 二) 圖二 、螢光分子(橘色)連接在Rece ptor上時， 由於整個分子 　　　 的滾動速度慢， 光線變化 的速度慢， 因此可得到較 　　　 大 的極光值(Polarizat ion) ;反之， 如果連結的位置被 　　　 專 一性較強 的藥物所取代， 僅剩下單 一的螢光分子 　　　 其 光線的變化快， 其極光值也會較小