- 1、本文档共27页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
- 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
8 植物胚培养
第九章 胚培养 植物胚培养技术概况: 1904年由汉宁(Hanning)首先做了试验。他把萝卜和辣根菜未成熟的胚培养在含有蔗糖、无机盐、氨基酸和植株提取液的各种培养基上,结果胚得到了充分发育,并获得了可移植的实生苗。 胚培养的意义 (1)幼胚培养能克服远缘杂交的不亲和性——进行“胚营救” (2)成熟胚培养能提高发芽率。可用于抢救储藏过久或储藏不当的种子。 离体胚培养的发育途径 一是按正常胚胎发育途径形成植株。 二是胚胎脱分化形成愈伤组织。 三是胚“早熟萌发”。 材料的消毒与接种 胚培养的外界条件 光照和温度与种胚的生长发育有密切关系。对于大多数植物的胚来说,以每天12小时光照和25?C的温度较为适宜,但有些材料则需要较高的温度。如马铃薯以20?C为宜,而棉花32?C生长最好。具有休眠习性的植物种胚,接种后先在4?C温度下培养一段时间,然后转入正常温度培养效果更好。光有利于胚芽的生长,而黑暗有利于胚根的生长。因此,以光暗交替培养为好。 幼胚的培养 基本培养基 生长调节剂及其它附加物的影响 基本培养基的原理 幼胚培养需要比较复杂的培养基。因为幼胚在胚囊里生长时是处于异养状态,幼胚的生长发育不仅依赖于它们细胞间的代谢,而且还依赖于周围胚乳的丰富营养。所以,要使离体胚能继续发育至成熟胚,必须尽可能提供与幼胚相似的环境条件。 培养基的渗透压 对幼胚的继续发育有密切关系。因为幼胚是“浸泡”在具有高渗透压的胚乳液里,离体后幼胚若突然移植于低渗透压的培养基中,往往会造成幼胚生长停顿,甚至导致幼胚死亡(糖浓度过低还会引起胚早熟萌发)。培养基的渗透压一般用蔗糖来调整,也可用葡萄糖或果糖,用量在8%—10%左右。幼胚的不同发育阶段,对培养基的渗透压要求不一,随着胚的发育,对渗透压的要求降低,因此蔗糖的浓度也须降低。 生长调节剂及其它附加物的影响 生长素和细胞分裂素要配合使用 添加复杂的天然植株提取液,如椰子、香蕉、南瓜等提取液。 维生素对于已经萌发的胚的生长并非必需,而对于发育初期的幼胚的培养来说,则必须加入一些种类的维生素,如硫胺素、吡哆醇、烟酸、泛酸钙等。 胚培养中,通常还可在培养基中加入活性炭。 接种和培养 幼胚培养直接出苗:剥胚法 切胚法 胚乳保姆法 胚培养诱导愈伤组织和植株再生 剥胚法 左手拇指和食指捏住消毒过的种子,盾片部位向上并面向接种者,右手用尖头镊子或解剖针挑破盾片部位外皮,再剥去内皮,轻轻挤压胚,用镊子尖粘住,盾片面向下接种在N6、B5 (表9-1)培养基上。置于培养箱或培养室,培养温度22—24?C,每天光照8—10小时,光照强度2000勒克斯。接种2—3天后多数能萌发,出苗率85%以上。 切胚法 种胚发育不良,盾片部位无明显突起的采用此法。把消过毒的种子切去1/3—1/2具冠毛的一端,切面向下(不要没入培养基中),接种在N6或B5培养基上。培养条件同上。此法出苗比剥胚法慢。发育差的胚接种后15—30天甚至更长的时间才能萌发,出苗率15%—30%;发育好的胚7—20天可萌发,出苗率60%以上。 胚乳保姆法 杂种在0.4mm以上可采用此法。胚乳比要接的杂种胚老2—5天效果较好。把欲取胚乳的种子消毒后,在解剖镜下将种子胚部的种皮去掉,然后去掉胚,挤出活体胚乳,接种在N6或B5 或“T+K”培养基+0.5mg/L赤霉素(GA)+0.5mg/L吲哚乙酸(IAA)+400mg/L水解乳蛋白(LH)培养基表面。然后把按照“剥胚法”剥出的杂种胚准确地移植于胚乳上原来胚的位置上。在18—20?C的温度下暗培养一星期左右,多数萌发;然后在22—25?C的温度,2000—3000勒克斯的光照强度,每天12小时光照下生长。 胚培养诱导愈伤组织和植株再生 愈伤组织的诱导 将按照“剥胚法”剥出的种胚,接种到MS无机成分+150mg/L DL-天冬素+0.5mg/L盐酸硫胺素(VB1)+1—2mg/L 二氯苯氧乙酸(2,4-D)+20g蔗糖和适量琼脂,pH值5.7的诱导愈伤组织培养基上。置于温度为26—27?C的培养室,每天光照10—12小时,光照强度2000勒克斯。5—6天后可产生肉眼可见的乳黄色愈伤组织,15—30天左右,从这些愈伤组织的局部产生出乳黄色、质硬、形状似小米粒的全能性愈伤组织。25天后将其分成2—3mm的小块,转移在MS继代培养基上(上述成分中2,4-D浓度减为0.5mg/L),培养条件同上。在继代培养基上,愈伤组织迅速增殖并产生许多绿色芽
您可能关注的文档
- 54创意实用的保险销售培训PPT模板.ppt
- 50种小菜+95家常菜.doc
- 400首儿歌(歇后语).ppt
- 580个高频词汇---cet6andcet4.doc
- 596个容易考到的的成语中公heoffcn.doc
- 59个家庭教育的哲理故事.doc
- 600重点单词.doc
- 50自然地理环境整体性与差异性.ppt
- 2018高考历史一轮复习第7单元第16讲近代中国社会经济结构的变动与民族工业的曲折发展课件.ppt
- 601成长足迹.ppt
- 2026届高考数学总复习(第1轮)基础版第50讲 直线的方程.pptx
- 《关于组织开展能源领域氢能试点工作的通知》解读及对策.docx
- 二年级数学奇妙的动物世界跨学科项目化学习设计.docx
- 高一美术传承与创新中国近现代美术思政融合课教学设计.docx
- 2025年湖北省省直辖行政单位选调生考试(行政职业能力测验)综合能力测试题带答案.docx
- 2025年温州医科大学仁济学院单招语文测试模拟题库附答案.docx
- 2025年清远职业技术学院单招(语文)测试模拟题库附答案.docx
- 2025年湖北省咸宁市事业单位招聘考试(职业能力倾向测验)题库及答案1套.docx
- 2025年温州大学单招语文测试题库有答案.docx
- 2025年湖北省荆州市单招语文测试模拟题库a4版.docx
文档评论(0)