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关于微生物鉴定检测方法改善汇报材料 汇报人：杜耿记 目 录 CONTENTS 1 背景目标 2 项目介绍 3 实施效果 4 可推广性 背景目标 1、原微生物作业指导书中微生物培养基和培养时间不满足现在检验需求以及方法中没有结合车间杀菌温度来鉴定微生物，不能够提供及时、有效分析坏包原因。 2、感谢集团领导以及质量管理中心给予技术支持和肯定，在14年4月份给马鞍山检验处配置一台VITEK 2 COMPACT全自动微生物鉴定仪。在微生物领域的鉴定能力和异常情况的分析有了进一步的提升。 项目介绍 总负责人：金珠 总负责人：金珠 职责：负责活动总策划和资源支持。 执行组：夏飞飞 职责：负责数据的收集整理与分析，改善实施情况的验证。 开发组：杜耿记 职责：负责方法的整体开发。 开发组：马菁菁 职责：试验操作以及检验数据的提供。 开发组：唐悦悦 职责：试验操作以及检验数据的提供。 开发组：杨晓萱 职责：试验操作以及检验数据的提供。 项目组织架构 项目介绍 微生物鉴定的培养时间不同 改善后 改善前 作业指导书中使用培养基为营养琼脂、锰盐琼脂培养24-72h和96-120h两个不同时间段。 1、用平板计数琼脂、乳平板计数琼脂培养18-48h和24-48h两个不同时间段。2、增加结合温度转化的“快速简便法”。 培养基的不同 实施效果： 从图可以看出在方法改善前、改善后，样品从保温实验PH值检测不合格→微生物鉴定结果录入系统缩短6天。大幅度降低了问题产品走入市场的风险。 改善后 改善前 检测结果录入时间对比 项目介绍 此方法就凸现“及时”“准确”，并和样品处理培养法检测结果能够保持一致。根据样品组织状态和PH指标可以采用直接镜检法，初步判断菌落形态，指导生产。如生产车间需要要该菌对温度要求，可根据样品处理培养法进行下面检测，可为生产出具更加详细的检验报告。 直接镜检法：G+杆菌 样品处理培养法：G+杆菌 快速简便法： 项目介绍 此方法结合车间杀菌温度以及NY/T 1331-2007《乳与乳制品中嗜冷菌、需氧芽孢及嗜热需氧芽孢数的测定》。对坏包样品进行一次80℃和100℃温度转化的过程以及培养时对温度的需求，结合转化的温度、培养的温度和镜检结果等方面来帮助生产分析产品是在前工段还是后工段污染。 快速简便法： 实施效果： VITEK 2 COMPACT微生物鉴定仪器法：通过各种生化反应，根据颜色或浊度的变化，仪器自动判读。最终将微生物鉴定到属或种的水平。在14年上半年使用VITEK 2 COMPACT微生物鉴定仪器指导武汉友芝友事业部优益C产品批量性胀包的原因分析。 传统微生物法和快速简便法：两者都是通过缩短检验周期，参考杀菌条件，以及微生物对温度需求，在显微镜下观察的菌落形态共同指导生产。在马鞍山事业部四期大型保温实验出现批量性胀包的情况时，通过“快速简便法”检出耐热性球拍状芽孢杆菌，及时迅速控制了微生物污染。 项目介绍 样品信息录入 样品进入仪器填充和切割、培养 VITEK 2 COMPACT微生物鉴定仪器法： 项目介绍 鉴于VITEK 2 COMPACT微生物鉴定仪检测数据较多，具有500多种结果。每次鉴定出结果并收集它的污染源便于以后工作的开展。 属 菌名 污染源 芽孢杆菌属 蜡样芽孢 50℃时不生长。在100℃下加热20min可破坏这类菌，常存在于土壤、灰尘和污水中，植物和许多生熟食品中常见。 肠杆菌属 阴沟肠杆菌复合物 阴沟肠杆菌广泛分布于环境中，土壤、水、污水、腐烂蔬菜和乳制品亦可发现，在阴沟污水中含量可高达10７/g。它是存在于人和动物肠道内的条件致病菌， 泛菌属 / 分离自植物表面、种子、土壤和水，也可从动物和人的伤口、血和尿中分离到。是人的条件致病菌。 鞘氨醇单胞菌属 少动鞘氨醇单胞菌 鞘氨醇单胞菌在环境中无处不在，河水、根际、地表及深层的地下的沉积物、海洋，甚至极地土壤中都有它们的踪迹。大量的已经从环境中分离出来。 不动杆菌属 鲍氏不动杆菌 不动杆菌广泛分布于外界环境中，主要在水体和土壤中，易在潮湿环境中生存，如浴盆、肥皂盒等处。该菌粘附力极强，易在各类医用材料上粘附，而可能成为贮菌源。此外，本菌还存在于健康人皮肤（25%）、咽部（7%），也存在于结膜、唾液、胃肠道及阴道分泌物中。感染源可以是病人自身（内源性感染），亦可以是不动杆菌感染者或带菌者，尤其是双手带菌的医务人员。传播途径有接触传播和空气传播。在医院里，污染的医疗器械及工作人员的手是重要的传播媒介。易感者为老年患者、早产儿和新生儿，手术创伤、严重烧伤、气管切开或插管、使用[1] 、行静脉导管和腹膜透析者，广谱抗菌药