土霉素(terramycin)、四环素.pptVIP

第九章 其他抗生素 第一节 四环类 有金霉素 (aureomycin)、土霉素(terramycin)、四环素(tetracycllne)、地美环素(去甲金霉素)及其半合成衍生物如多西环素(强力霉素)、美他环素(甲烯土霉素)、米诺环素(二甲胺四环素)等。 四环素类抗生素的疗效 四环素：血液中能维持一定浓度，毒性低，疗效好，医疗上应用较广。 金霉素：副作用较大，可以引起严重肠胃道反应和呕吐等。但金霉素对一些耐青霉素的金葡菌所引起的各种严重感染有相当疗效，而这些感染却不能为四环素或土霉素所控制。 土霉素：对呼吸道感染及肠道感染均有相当疗效。土霉素控制阿米巴肠炎及肠道感染的效果胜过四环素、多西环素、美他环素、米诺环素等。 畜用土霉素：需量很大，治“猪瘟”及“猪喘气症”的疗效比四环素为好。防止某些畜禽疾病，促进动物生长 效果好。 一、四环类抗生素的性质及合成机理 (一)、理化性质 溶解性：四环类抗生素在pH4.5-7.2间难溶于水，且此间溶解度几乎一定，较酸较碱液中，溶解度大些，盐类易溶，过剩的酸可防水解及析出碱。在极性弱的溶剂中，如酯、醚、芳烃或脂肪烃等，溶解度较小或不溶解。在有机溶剂中，其盐酸盐和游离碱的溶解度是相近的。无水土霉素和四环素在四氢呋喃和1，2—二甲基乙烷中的溶解度能达到10％左右。土霉素碱在含水溶剂中的溶解度低于纯溶剂，而其盐酸盐则相反。土霉素盐酸盐最好的溶剂是醋酸和90％丙酮。 晶体性质：黄色结晶物。从水中结晶得到的四环素含6分子结晶水，水的含量达到19.6％。含水有机溶剂中得到的四环素含3分子结晶水。从水中结晶得到的土霉素则含2分子结晶水，水的含量达到7.5％。加热失去结晶水。他们都有吸湿性，含水量分别低于19.6％和7.5％的四环素和土霉素放在空气中吸收水分。固体四环类抗生素较稳定。 pH稳定性：四环类抗生素的水溶液在不同pH值下的稳定性差别很大。例如，金霉素在碱性条件下很不稳定，在pH值为14.0、9.8、7.6时的半衰期分别为40s、3.5h和12h。在酸性条件下四环素较稳定。四环类抗生素对各种氧化剂，包括空气中的氧气在内，都是不稳定的。其碱性水溶液特别容易氧化，颜色很快变深形成黑色。成品在贮存中颜色变深也和空气中氧的作用有关。 (二)、化学性质和降解反应 1．脱水化合物 在弱酸性溶液中稳定,较酸的溶液中(pH2)，四环素因6位上的叔羟基易脱落，在5a～6位上形成双键破坏,由于新双键的影响，C-11、C11a、C-12上双键发生转移，而使环C芳构化。 脱水四环素和金霉素中，因双键数增多，色泽加深呈稳定黄色。此反应可用于四环素和金霉素的化学鉴定。 2．差向化合物 3. 降解反应 4. 螯合物与复合物 (三)、四环素的合成机理 二、四环素的发酵工艺 (一)、生产菌种 菌种：金色链霉菌 (S．aureo fa-ciens)、诺卡菌属、马杜拉放线菌属。 菌落特征：金霉菌在马铃薯、葡萄糖等固体培养基中生长，营养菌丝分泌金黄色色素，但气生菌丝没有颜色。孢子初形成是白色，28℃培养5～7d，孢子从棕灰色变为灰黑色。孢子形状呈圆形或椭圆形，也有方形或长方形，孢子在气生菌丝上排列成链状。 (二)、种子制备及控制要点 1．孢子制备 砂土孢子接种斜面时进行一次自然分离，挑选菌落形态正常者接种在第二代斜面上。 流程为：砂土管→母斜面→子斜面→种子罐→发酵罐 2．种子培养 种子培养基：蛋白胨、花生饼粉、淀粉等 培养条件：30～32℃，经24～27h培养即可成熟 成熟标志：菌丝形态处在第Ⅱ期末或第Ⅲ期初；菌体处于代谢旺盛阶段，碳、氮源明显被利用；pH值下降后又上升，达到6.0左右；培养液因菌丝增加而黏稠，色泽逐渐带黄色，并出现少量四环素。 种子培养时通气、搅拌对种子的生长有很大的影响。 (三)、影响发酵的因素及工艺控制要点 四环素生产一般采用二级或三级发酵方式。 1．培养基 氮源：花生饼粉、黄豆饼粉、棉籽饼粉、(NH4)2S04、NH4Cl、NH4N03、尿素等，脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、丙氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、苏氨酸及胱氨酸均能刺激金色链霉菌产四环素或金霉素。过量的氮源，抑制四环素的合成。含100—200mg/L氨基氮的氨基酸较适宜。 碳源：淀粉(也可用玉米淀粉、燕麦粉、土豆粉等代替一部分)、可溶性淀粉、葡萄糖、糖蜜及油脂等。采用玉米淀粉作为培养基时，可在灭菌前预先用酶进行水解，对提高发酵单位有利。 抑氯剂：用金霉菌生产四环素，加入竞争性的抑氯剂--溴化钠和抑氯剂—促进剂M(2—巯基苯并噻唑)，阻止金霉素，促进四环素合成，使金霉素在总产量中低于5％。浓度较大对菌有毒。 P：从10μg／mL增至45μg／mL，菌体的比生长速率快速增加，但增至270μg／mL时，不再变化。 铁离