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送检病料的注意事项
上海农场生产技术服务中心
吴中彬
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一、送检病料的选择
1、采集发病初期,临床症状明显的,未用抗生素(1周内)治疗的发病猪只,采病料的时间应在病猪死后的数小时内进行(冬季6小时内、夏季4小时内)。
2、怀疑某种疾病时,应采取该病常侵害的部位。
3、提不出怀疑对象时,可以将整个病猪送检。
4、败血性传染病,如猪瘟、败血性链球菌病,可以采取心、肝、脾、肺、肾、淋巴结以及胃肠等组织。
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一、送检病料的选择
5、专嗜性传染病或侵害某种器官为主的传染病,则采取该病侵害的主要器官组织,如猪大肠杆菌病采取肠管以及肠内容物,有神经症状的传染病采取脑、脊髓等。
6、检查疫苗免疫效果时,则需采取血液,待凝固析出血清后用于检测。
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二、病料采集的注意事项
1、解剖前检查:凡发现病猪急性死亡时,切不可随便解剖。未解剖前,必须由末梢血管采血(或局部采血)作涂片,检查是否患有炭疽杆菌。操作时应特别注意,勿使血液污染他处,以防传播和对人体的伤害。当确定不是炭疽时,方可解剖。
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二、病料采集的注意事项
2、采集器械的消毒:采集用的刀柄、刀片、剪刀、镊子等用具可以煮沸30分钟,然后用酒精棉球擦拭,并在火焰上烧一下。器皿在高压灭菌器内或干燥箱内灭菌;软木塞或橡皮塞置于0.5%石炭酸溶液中煮沸10分钟。载玻片应在1%-2%的碳酸氢钠溶液中煮沸10-15分钟,水洗后再用清洁纱布擦干,将其保存于酒精中。注射器和针头放于清水中煮沸30分钟即可。
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二、病料采集的注意事项
3、病料采集人员需带好手套,穿上防护服和雨靴,病料采集好后要注意场所和人员(尤其是参与病料采集的饲养员)的消毒,防止人为的扩散病原。
4、每个猪场最好有固定的采集病料的地点,以便消毒和隔离。
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三、病料的保存
采取病料后要及时送实验室检测,如病料不能不能立即进行检测,或须送往外地检验时,应加入适量的保存剂,使病料尽量保持新鲜状态,以便得出正确的结果。
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二、病料的保存
(一)细菌检测材料的保存
将采取的组织块,保存于饱和盐水或30%甘油缓冲液中,容器加塞封固。
1、饱和盐水配制 蒸馏水100毫升,加入氯化钠38-39克,充分搅拌溶解后,用数层纱布滤过,高压灭菌后备用。
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二、病料的保存
2、30%甘油缓冲溶液的配制 纯净甘油30毫升,氯化钠0.5克, 碱性磷酸钠1克,蒸馏水加至100毫升,混合后高压灭菌备用。
(二)病毒检验材料的保存
将采取的组织块保存于50%甘油生理盐水或鸡蛋生理盐水中,容器加塞封固。
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二、病料的保存
1、50%甘油生理盐水的配制 中性甘油500毫升,氯化钠8.5克,蒸馏水50毫升,混合后分装,高压灭菌后备用。
2、鸡蛋生理盐水的配制 先将新鲜鸡蛋的表面用碘酒消毒,然后打开,将内容物倾入灭菌的容器内,按全蛋9份加入灭菌生理盐水1份,摇匀后用纱布滤过,然后加热至56 ℃ -58℃,持续30分钟,第二日和第三日各按上法加热1次,冷却后即可使用。
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二、病料的保存
(三)病理组织学检验材料的保存
将采取的组织块放入10%福尔马林溶液或95%酒精中固定,固定液的用量须为标本体积的10倍以上。如用10%福尔马林固定,应在24小时后换新鲜溶液1次。严寒季节为防组织块冻结,在送检时可将上述固定好的组织块取出,保存于甘油和10%福尔
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