基于液滴微流控的壳寡糖植物免疫诱导剂荧光检测 - ingenta connect.pdf

第 33 卷 第 2 期 农 业 工 程 学 报 Vol.33 No.2 302 2017 年 1 月 Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering Jan. 2017 基于液滴微流控的壳寡糖植物免疫诱导剂荧光检测 1,2 2 3 2 2 1 1※ 苍小鑫 ，赵小明 ，钟润涛 ，王文霞 ，尹 恒 ，朱靖博 ，丁 燕 （1. 大连工业大学食品学院，大连 116034 ；2. 中国科学院大连化学物理研究所，大连 116023 ； 3. 大连海事大学环境科学与工程学院，大连 116026 ） 摘 要：为了建立基于液滴微流控芯片平台的植物免疫诱导剂的荧光信号检测技术，该文设计制作了具有液滴生成结构 的芯片，制备包裹烟草（BY-2 ）细胞的液滴，并对包裹了细胞的液滴数目进行统计分析。将包裹细胞的液滴孵育一氧化 氮探针后使用质量浓度为 50 μg/mL 壳寡糖处理，在荧光显微镜下观测其产生的荧光，利用荧光酶标仪对比采用 96 孔板和液 滴承载的细胞的荧光变化趋势。结果显示，水相流速为 100 μL/h，油相流速为300 μL/h 时，微流控芯片产生的液滴尺寸适 合包裹细胞，其中液滴包裹单细胞的比例达 22.9% 。经壳寡糖处理后的细胞在生成的液滴中产生了明显的荧光，且用96 孔 板和液滴承载的细胞的荧光变化趋势一致。研究结果为开发基于液滴微流控技术的植物免疫诱导剂的高通量筛选平台提供 参考。 关键词：微流控；包裹；荧光；植物免疫诱导剂；烟草细胞；壳寡糖 doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2017.02.042 中图分类号：S4 文献标志码：A 文章编号：1002-6819(2017)-02-0302-06 苍小鑫，赵小明，钟润涛，王文霞，尹 恒，朱靖博，丁 燕. 基于液滴微流控的壳寡糖植物免疫诱导剂荧光检测[J]. 农 业工程学报，2017，33(2)：302－307. doi ：10.11975/j.issn.1002-6819.2017.02.042 Cang Xiaoxin, Zhao Xiaoming, Zhong Runtao, Wang Wenxia, Yin Heng, Zhu Jingbo, Ding Yan. Fluorescence detection of chitosan oligosaccharides plant immune elicitors based on droplets-microfluidics[J]. Transactions of the Chinese Society of Agricultural Engineering (Transactions of the CSAE), 2017, 33(2): 302 －307. (in Chinese with English abstract) doi： 10.11975/j.issn.1002-6819.2017.02.042 [3] 1 Cheong 等 用大豆子叶法测定葡寡糖诱导剂的活性，该 0 引 言 法被其他研究者应用测定其他诱导剂的活性，被认为是 植物免疫诱导剂是通过激发植物自身的防卫反