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２００８年３月　第１０卷　第３期 中国现代中药ＭｏｄｅｒｎＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ Ｍａｒ２００８　Ｖｏｌ１０　Ｎｏ３  ＨＰＬＣＣＤ）  宋爽，王金辉 ，孙铁民，左文健，周玉波 （沈阳药科大学，辽宁　沈阳　１１００１６） ［摘要］目的：建立确定葡萄糖绝对构型的方法。方法：葡萄糖经衍生化引入对溴苯甲酰基发色团，从粗产物 中分离出 型衍生物，再用配备圆二色（ＣＤ）检测器的手性高效液相进行分析。结果与结论：Ｄ型和Ｌ型葡萄糖的 β β 型衍生物在手性高效液相上得到较好分离，通过 型衍生物的保留时间、色谱峰的方向（正峰或倒峰）以及在线扫描 β 的圆二色谱图来确定葡萄糖的绝对构型。 ［关键词］葡萄糖；绝对构型；圆二色检测器；手性高效液相 糖是维持生命活动的最重要物质基础之一，除 了已被人们所熟悉的作为结构物质和能量物质的作 用，糖类作为信息分子在受精、发生、发育、分化， 在神经系统和免疫系统衡态的维持等方面起着重要 作用，糖链被称为继核酸、蛋白质之后 “第三条生 ［１３］ 命链” 。许多中药的活性都与糖及其衍生物有着 密切的关系，尤其是糖与非糖物质结合的苷很多具 有生理活性。虽然已有许多糖类化合物被开发成新 药，但对糖的结构的研究还不够充分，特别是糖的 绝对构型问题，研究报道非常少。很多研究已证实 绝对构型不同的一对对映异构体常常具有不同的生 理活性［４］，所以测定糖的绝对构型是非常必要的。 作者将葡萄糖甲苷化（甲醇解）后引入对溴苯甲酰基 图１　葡萄糖的衍生化过程及其衍生物的结构 发色团，采用非手性色谱手段从衍生化产物中分离 葡萄糖衍生化反应的主产物是 型和 型衍生 α β 出 型衍生物，应用配备圆二色（ＣＤ）检测器的手性 β 物，二者为差向异构体，可以采用非手性色谱方法 高效液相进行分析，确定葡萄糖绝对构型。 分离出微量的 型衍生物用于手性 ＨＰＬＣ分析。因 β １　方法原理 为对映异构体在手性色谱上的保留行为不同，圆二 色谱呈镜像关系，所以可以用手性ＨＰＬＣＣＤ区分  因为葡萄糖２００ｎｍ以上没有紫外吸收，首先需 β ＤＧ和 ＬＧ，并可以通过色谱峰面积求算对映体 将葡萄糖衍生化，引入发色团。反应过程及衍生化 β 产物结构如图１所示。 纯度。 参与该反应的衍生化试剂均为非手性，所以Ｌ ２　仪器与试药 葡萄糖生成 型（或 型）衍生物的产率与Ｄ葡萄糖 β α ２１仪器 生成 型（或 型）衍生物的产率是相等的，则 型 β α α 高效液相系统（日本ＪＡＳＣＯ）包括ＰＵ２０８０输液 衍生物和 型衍生物中的对映体纯度是相同的。