人卵巢组织慢速程序化冷冻保存方案的初步探讨 - 中国医科大学学报.pdf

中国医科大学学报 第44卷 第5期 2015年5月 JournalofChinaMedicalUniversity Vol.44 No.5 May2015 ·425 · ·论著 · 人卵巢组织慢速程序化冷冻保存方案的初步探讨 刘丽英，曲文玉，蒋丽，张晓丽，刘晓莉 （沈阳市妇婴医院生殖中心，沈阳 110014） 摘要 目的 系统比较不同冷冻保护剂在不同浓度时对卵巢组织慢速程序化冷冻效果的影响。方法 卵巢组织来源于15例 卵巢良性肿瘤手术的患者。分别采用丙二醇（PROH）、乙二醇（EG）、二甲基亚砜（DMSO）作为冷冻保护剂，在每种冷冻保护剂 1.5mol/L或2.0mol/L浓度下进行慢速程序化冷冻。每例患者平行进行上述6种冷冻程序，光镜及电镜下分析卵泡的形态正常 率，结果与该患者的新鲜对照组织比较。结果 各组中不同发育阶段的卵泡分布无统计学差异（P0.05）。光镜观察显示，1.5 mol/LEG组及2.0mol/LEG组的冷冻效果最好，与新鲜对照组织相比卵泡形态正常率无统计学差异（P0.05）；1.5mol/LPROH 组、2.0mol/LPROH组、1.5mol/LDMSO组及2.0mol/LDMSO组与新鲜对照组织相比，卵泡形态正常率的差异有统计学意义 （P0.05）。电镜观察显示，经程序化冷冻后，卵母细胞质量下降，但由于数据少未进行统计分析；与新鲜对照组织相比，6个冷 冻组颗粒细胞的活力均明显降低（P0.01）。形态正常的颗粒细胞数量在2.0mol/LPROH组及1.5mol/LEG组中稍高，但6个 冷冻组间两两比较，差异无统计学意义（P0.05）。结论 慢速程序化冷冻采用1.5mol/LEG作为冷冻保护剂，能较好的保存卵 泡中的卵母细胞及颗粒细胞，是一种较好的冷冻卵巢组织的方案。 关键词 冷冻保存；人卵巢组织；超微结构；慢速程序化冷冻 中图分类号 R71 文献标志码 A 文章编号 0258-4646（2015）05-0425-05 网络出版地址 Preliminary Study of Human Ovarian Tissue Cryopreservation by Controlled⁃rate Freezing LIULi⁃ying，QUWen⁃yu，JIANGLi，ZHANGXiao⁃li，LIUXiao⁃li （DepartmentofReproductiveCentral，Women’sandChildren’sHospitalofShenyang，Shenyang110014，China） Abstract Objective Tocomparetheeffectofdifferentcryoprotectantsanddifferentconcentrationsoncontrolled⁃ratefreezingofhumanovarian tissues.Methods Ovariantissuesweresampledfrom15patientsundergoingbenignovariantumorsurgery.Corticalsliceswerefrozenbycontrolled⁃ ratefreezingusingthreecryoprotectants，propanediol，ethanediol，anddimethylsulphoxide，andtheconcentrationofeachcryoprotectantwas 1.5 mol/Lor2.0mol/L.Corticalslicesobtainedfromeachpatientwereprocessedwitheachcryopreservationproceduresimultaneously.Morphologyoffol⁃ licleswasstudiedbylightandelectronmicroscopyandthenormalratewascomparedwiththatofthefreshtissuesfromthepatient.Results There werenosignificantdifferencesindistributionoffolliclesofdifferentdevelopmentalstagesbetw