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遗传学研究型实验
遗传学综合创新性实验 课程设计与指导:黎双飞、王娟、聂晓云老师 2012年4月 一、实验目的与实验要求 目的 培育自信; 训练自主学习和拓展知识的能力。 提高动手能力、创新能力与综合素质。 为提前参与科学研究活动打下基础。 实验要求: 3-4人一组。鼓励自己选择植物种子。 利用课外时间(双休日)自主管理、实施实验计划。 实验结束后,每个项目组成员可以充分利用本小组的实验数据和资料信息; 论文必须独立完成。 二 教学方式与辅导时间 同学实验时间与教师辅导答疑时间 正常实验教学时间内,进行集中教学和辅导。周一~周五课外时间(包括晚上),接受学生咨询和实验项目问题的探讨。双休日,实验室对参加本课程学习的同学开放,开放时间:9:00~21:00。各位同学自己安排实验时间。 三 可选主题 1 多倍体花卉的诱导和培育 2 诱导物对果蝇生物量及酶活性影响的研究 3 植物的染色体显带和分型研究 实验目的 1.熟悉人工诱导多倍体的原理,初步掌握用秋水仙素诱发多倍体的方法。 2.掌握植物多倍体细胞染色体加倍的特点及染色体制片的一般方法; 3. 熟悉常用的生物量统计方法。 人工诱导多倍体的方法很多,分为物理的(温度剧变、机械损伤、各种射线处理等)和化学方法的(各种植物碱、麻醉剂、植物生长激素等)诱导方法。其中,秋水仙素是诱导多倍体的最有效的方法之一。 多倍体植物的特点:巨大性、不育性、代谢合成强、适应性强、克服远缘杂交的不结实性。 实验材料 黄豆、绿豆、蚕豆、大蒜种子,或其他植物的种子。 实验仪器及用具 显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、滴管,吸水纸、培养皿 药品和试剂 1%秋水仙素溶液,1 mol/L HCl溶液 、改良苯酚品红等 种子材料: 1、黄豆、绿豆、红豆种子浸在0.5%的秋水仙素溶液24小时(浸没种子的2/3)。用自来水冲洗2-3次。 2、将萌发种子移到盛有0.025%秋水仙素溶液润湿了吸水纸的培养皿中,培养发芽。48小时后取出幼苗,用自来水缓缓冲洗幼苗。 3、把处理后的幼苗栽种在盆钵内,同期栽种未经处理的的种子作为对照。 4、栽种期间给以良好的管理。 观察与鉴定 烟草2倍体,4倍体和8倍体叶片表皮细胞的比较 注意事项: 1、 秋水仙素处理时间应根据供试材料的细胞周期而定,当处理时间介于供试材料细胞周期的一倍到两倍之间时,可观察到细胞由二倍体变为四倍体,当处理时间多于供试材料细胞周期的两倍以上时,供试材料的细胞可从四倍体变为八倍体,因此,在培养多倍体细胞时,应注意用秋水仙素的处理时间;此外,秋水仙素的浓度对处理效果也有影响,应注意掌握。 2、 秋水仙素为剧毒药品,实验中应注意不要将药品沾到皮肤上,眼睛中。如果沾到皮肤上,应用大量自来水冲洗。 注意药剂浓度和处理时间的选择 溶液的浓度不宜过高或过低。过高,会引起伤害,以至致死;过低,又不起作用。一般采用临界范围内的高浓度、短时间处理。 通常,草本浓度较低,木本浓度较高。 果树、树木:1-1.5%,蔬菜、草本花卉:0.01-0.2% 甘蓝、白菜、南瓜、萝卜的试验表明,在0.01-0.2%的范围内,随浓度增高,突变的百分率也显著提高。 处理时间以细胞分裂周期为转换。 3.2 诱导物对果蝇生物量及酶活性影响的研究 选择不同种类的环境污染物、植物提取液、食品添加剂等,通过半致死剂量分析确定诱导物的浓度梯度,通过分析不同浓度组和对照组之间果蝇生物量集体内相关酶活性的检测,分析污染物对生物个体可能产生的相关影响,为毒理遗传 提供实验依据。 实验项目的研究内容主要包括: 1. 查询资料,选择的污染物种类; 2.确定实验组污染物的浓度梯度; 3. 开展试验,数据统计; 4.果蝇的匀浆液制备和酶活测定; 5. 实验结果的总结、比较和分析。 6.撰写实验论文 3.2 诱导物对果蝇生物量及酶活性影响的研究 【要求】 (1)具备遗传基础实验的基础,工作细心,具有耐心;熟悉统计学软件(如SPSS等)的同学优先考虑; (2) 并要求学生自行设计实验,学生可以在此基础上适当自行增加一定与本实验相关的研究内容。 (3)学生自行安排时间进行实验,实验过程中要求学生尽量做到独立思考、独立解决实际问题,遇到难题与指导老师共同商量或者征求实验方法指导。 (4)老师在实验过程中要了解、及时跟踪学生的实验动态、实验进展和实验结果,并就实验中解决问题的能力打分。 (5)实验结果最终要求以科学论文的格式进行撰写,要求格式规范、方法清晰、结果详实、分析得当、结论明确。 3.3植物的染色体显带和分型研究 【主要内容】 择常见的属内生物(动物或植物)作为实验材料,采用拟定的染色体制备技术获得染色体分型好的装片,确定不同物种的染色体数目及属内生
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