菌渣固态发酵菌体蛋白饲料的工艺优化 - 江苏农业科学.pdf

— ２７０— 江苏农业科学　２０１６年第４４卷第９期 张婷婷，马　磊．菌渣固态发酵菌体蛋白饲料的工艺优化［Ｊ］．江苏农业科学，２０１６，４４（９）：２７０－２７２． ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１６．０９．０７６ 菌渣固态发酵菌体蛋白饲料的工艺优化 张婷婷，马　磊 （石河子大学生命科学学院，新疆石河子８３２０００） 　　摘要：为了综合利用菌渣废弃物，采用酵母菌协同固态发酵技术，探究将食用菌多糖提取废渣转化为蛋白饲料的 工艺条件。从不同基质、温度、水料比、发酵时间４个方面，分析影响固态发酵菌渣转化蛋白的因素，并通过正交试验 优化菌渣固态发酵工艺。结果表明，影响蛋白质含量的主次因素依次为基质配比＞发酵时间＞温度＞水料比；在酵母 菌接种量１３％条件下，菌渣与麸皮的适宜质量比８∶２、水料比１ｍＬ∶２．５ｇ、３０℃下培养９６ｈ，此时发酵物的粗蛋白含 量可达峰值１８．４３％。本研究将废弃菌渣转化高蛋白的方法，可促进菌渣的再利用，为高效资源循环使用奠定基础。 　　关键词：菌渣，固态发酵，蛋白饲料，正交设计 　　中图分类号：Ｓ８１６．４　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１６）０９－０２７０－０２ 　　菌渣废弃物一般富含水分、易腐烂、不易保存，直接排放 １．２．３　液体种子培养　在无菌条件下，用１０ｍＬ无菌水冲洗 污染环境。随着经济的快速发展和人们生活水平日益提高， 斜面培养基上已活化的菌种，接种至盛有８０ｍＬ液体种子培 畜牧产品需求增大，致使饲料缺口逐年增加，出现了供求关系 养基的三角烧瓶中，置于摇床中，在３０℃、１６０ｒ／ｍｉｎ的条件 ［１］ 难以平衡的局面 。因而，寻求新蛋白源成为饲料科学中的 下振荡培养７２ｈ。 ［２］ 一项重要课题 。目前，运用微生物发酵生产蛋白饲料越来 １．２．４　固体发酵培养　在无菌条件下，将酵母菌以１３％ 的 ［３－４］ 越受重视 。本研究探讨不同基质配比、不同温度、不同料 接种量接种到已灭菌的固体发酵培养基中，置于２５～４０℃恒 水比以及不同培养时间对酵母菌发酵蛋白质含量的影响，并 温箱中培养７２ｈ。待培养结束后，将培养物置于５０℃烘箱中 在单因素试验的基础上，采用正交试验法对菌渣固态发酵菌 风干，测粗蛋白质含量。基础对照为未发酵样品，将试验所用 体蛋白饲料的工艺进行优化。 的金顶侧耳菌菇多糖提取后的残渣在５０℃条件下烘干，随机 称取０．２ｇ未经酵母菌发酵样品，测定其蛋白质含量。 １　材料与方法 １．２．５　粗蛋白质含量的测定　采用微量凯氏定氮法测定粗 １．１　材料 蛋白质含量。将发酵好的培养基烘干至恒质量，称取０．２ｇ 酵母菌、提取金顶侧耳菌菇多糖后残留菌渣、麸皮、马铃 烘干后的培养基，放入干燥的消化管中，再加入０．４ｇ的混合 薯浸取液、葡萄糖、琼脂粉、玉米粉、浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜、 催化剂后，加入２０ｍＬ的浓硫酸。待消化管中液体冷却后，加 ４０％ ＮａＯＨ溶液、ＨＣｌ溶液、混合滴指示剂（０．１％甲烯 入蒸馏水２０ｍＬ，进行蒸馏，在接收瓶中加入２％ＨＢＯ５０ｍＬ ３ ３ 蓝 ∶０．１％ 甲基红＝１∶４）。 和２～３滴指示剂，用０．０５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ滴定接收瓶内的溶液， １．２　方法 滴定溶液由绿色变成淡紫色或灰色时为滴定终点，记下消耗 １．２．１　基础培养基的制备　马铃薯葡萄糖琼脂培养基