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东北师范大学授权专利推介表 专利名称 特异序列基础的水通道蛋白4
东北师范大学授权专利推介表
专利名称 特异序列基础的水通道蛋白4高效价抗体的制备及应用 专利号 2010101648511 第一发明人 李晓萌 所属单位 东北师范大学 E-mail Lixm441@nenu.edu.cn 技术领域 □电子与信息 生物医药 □新材料 □光机电一体化 □环境保护 □新能源、节能技术 □化工 □轻工 □农林牧渔 □其它 技术水平 未鉴定 通过 组织专家鉴定,为(□国内先进 □国内领先 □国际先进 □国际领先)水平 所处阶段 实验室研发 □小试 □中试 □小批量生产 □批量生产 □其它 成果简介(包括依托项目、主要技术指标、成果优势等,不超过800字):
成果受到“RNAi干扰技术的水通道蛋白1基因功能研究校内自然科学青年基抗体相互作用基础上发展起来的一系列技术,如免疫组织化学、免疫印迹和免疫沉淀等,在蛋白质的检测和功能研究中都有着广泛的应用。
水通道蛋白4作为一种跨膜的蛋白分子,其中的疏水片段是无法进行原核表达的,而膜外小的亲水区域无抗原性或抗原性较小。现世面出售的AQP4抗体是以人工合成短肽链作为抗原制备而成,其抗原蛋白的空间结构较AQP4蛋白的空间结构有很大差异。
本发明的目的是建立一种能够用于AQP4的检测的模型,为从蛋白水平深入研究AQP4功能及相关疾病提供必要的实验工具。
利用基因工程技术,将小鼠AQP4基因近3′端亲水区克隆到原核表达载体pGEX-4T-1 中。转化BL21后可高效表达特异性的GST-AQP4融合蛋白。以该融合蛋白免疫兔子获得抗GST-AQP4融合蛋白的高效价抗血清且特异性良好,克服了现存的以人工合成肽制备的抗体时,其抗原空间结构与表达蛋白差异大的缺点,所得到的抗体的效价和特异性都有大幅提升。可应用于对AQP4的检测,推进从蛋白水平AQP4功能的深入研究。 图片1—2张及文字说明(不超过100字):
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纯化后的GST及GST-AQP4融合蛋白SDS图
其中1、2.GST(26KD) ; 3、4.GST-AQP4(30KD)
抗GST-AQP4 血清免疫组化鉴定结果
其中左侧为野生鼠的脑组织,右侧为敲除鼠的脑组织 投资规模及条件(不超过100字):
本实验室具备所需的关键仪器设备和研究工作条件,包括蛋白质研究的各种设备和组织细胞培养、分子生物学试验的仪器装备,组织病理学设备及配套设施,为提供了强大的技术支撑
AQP4功能的深入研究。
成果拟转化方式 □技术转让 □许可使用 合作开发 □不限 预计技术交易额
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