癫痫引起认知功能障碍与海马NR2B表达的变化.pdfVIP

中文摘要 癫痫引起认知功能障碍与海马NR2B表达的变化 摘 要 目的：癫痫是由多种原因引起的慢性脑功能障碍综合 症，是神经系统常见病。癫痫患者除癫痫发作外，常伴有注 意力分散、学习记忆能力减退等认知功能受损的表现。其中 学习记忆能力减退是癫痫患者认知障碍中最常见的症状，越 来越引起人们的重视。但是由于其机制还不清楚，所以在临 床工作中还找不到行之有效的方法来防治癫痫引起的认知 物模型，观察慢性点燃癫痫大鼠脑电图和学习记忆能力的改 变，并运用免疫组织化学和反转录多聚酶链反应方法观察其 receptor2B，NR2B)I拘表达变化，对癫痫引起的认知功能障碍 的机理进行探讨，为临床实践提供理论基础。 方法： 1造模 采用戊四氮腹腔注射慢性点燃癫痫(chronic epilepsy， CEP)模型，选取经Y迷宫筛选合格的清洁级雄性 g，12 h光亮／黑暗条件、2225℃环境温度，分笼喂养。随机分 为两组：慢性癫痫组(chronicepilepsygroup，CEP组)60只， control 正常对照组(normal 35 每日晨8：00-9：00腹腔注射PTZ mg／kg，连续30天，每 中文摘要 天注射完毕后观察1小时。NC组大鼠给予同等剂量、同等 次数的生理盐水。依据Racine分级标准将大鼠行为分为6级。 0级：无任何反应；I级：胡须动、面肌抽动；II级：点头、 咀嚼或湿狗样抖动(wetdog 起、阵挛；Ⅳ级：站立伴有双侧前肢阵挛；V级：跌倒、全 身强直阵挛性发作。完全点燃的标准是获得连续3次Ⅳ级或 以上的运动惊厥。 2脑电图 将大鼠麻醉后固定于脑立体定位仪上，将电极放置于双 侧皮质和双侧海马部位，按上述模型分组描记脑电图。 3行为学检测 应用Y迷宫、水迷宫、检测大鼠癫痫前后学习记忆及 情感反应能力的变化。 4免疫组织化学染色 行为学检查后，分别随机选取模型组和对照组大鼠各8 只在水合氯醛深度麻醉下灌注，取脑固定，常规包埋，标本 冠状位石蜡切片。经抗原修复、羊血清封闭后，加多克隆抗 体，再经二抗、三抗孵育，DAB显色后置显微镜下观察记录。 5逆转录多聚酶链反应 行为学检查后，分别随机选取模型组和对照组大鼠各8 只，迅速分离海马，经提取海马，ee,RNA、逆转录合成cDNA、 引物扩增后，扩增产物在琼脂糖凝胶上电泳，用凝胶成像系 统扫描定量并摄像电泳条带的灰度，凝胶图象分析系统分析 厶士田 o 多口5,gz 结果： 1动物模型制备 中文摘要 CEP组大鼠在连续注射第610天起开始出现凝视、点 头、反复洗脸动作、面部及头部抽搐等，以后发作症状逐日 加重，于给药第18～24天全部出现全身肌阵挛、双前肢抬起， 最终发生全身强直．阵挛性发作，伴有跌倒、翻滚及流涎，达到 均无癫痫发作表现。 2脑电图结果 1Hz NC组表现为基本波动为9—1a节律，低、中辐两侧 对称。CEP组大鼠发作间期的脑电图表现为基本波动为低幅 1Hz 的9．1 Q节律，阵发性出现痫性放电，表现为高幅多棘 综合波，持续1．2秒。 3行为学检测 3．1水迷宫试验癫痫后，CEP组大鼠逃避潜伏期第1 天与对照组比较，无显著性差异(P0．05)，第2天高于对照 寻平台而穿越平台区域的次数明显低于NG组(P0．01)，在 平台所在象限的游泳时间与对照组比较无显著性差异 (P0．05)。 3．2Y迷宫试验CEP组与对照组比较大鼠的错误反应 次数增多(尸O．05)，但全