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哈尔滨工程大学计算机科学与技术学院硕士学位论文答辩 */20 * 基于磁性石墨烯基纳米复合物修饰印刷电极的新型过氧化氢传感器研究 系 别：化学与化学工程系 专业年级：2012材料化学 组 员 ：李升杰、张飞、李时庆、 江峻亮、周胜林 指导教师：杨欣 职称：讲师 * 作品撰写的目的和基本思路 过氧化氢(H2O2)在食品工业、临床应用、环境分析等领域应用广泛。同时，它也是葡萄糖氧化酶、胆固醇氧化酶等一系列酶促反应的重要副产物。因此，发展灵敏、快速、低成本的H2O2检测方法与仪器具有重要意义。 该论文首先以印刷电极(SPCE)为基材，在外加磁场作用下在SPCE表面共修饰金磁微粒(Fe3O4-Au)包被辣根过氧化物酶(HRP)以及石墨烯-Nafion膜，制备了外磁场可控的H2O2快速检测用一次性电化学生物传感器。然后对磁性石墨烯基纳米复合物制备、传感器构建以及检测条件、等进行了优化。最后在优化的实验条件下对实际样品中的痕量H2O2进行了检测，实验结果令人满意。 * 作品科学性、先进性及实际应用价值 本论文采用金磁微粒(Fe3O4-Au)包被辣根过氧化物酶(HRP)以及石墨烯-Nafion膜共修饰丝网印刷电极构建了一种新型的过氧化氢(H2O2)快速检测用电化学生物传感器。该传感器相对于已报道的文献，能够实现HRP的直接电子传递，该传感器具有灵敏快速、制备容易、样品用量少、可抛弃、外磁场可控、抗干扰性强、等优点。 本论文构建的平台技术具有通用性，可进一步推广至其它食品或药品的检测。并可作为气相色谱、液相色谱、色谱-质谱联用等方法的有益补充，在食品以及药物分析方面具有理论意义和潜在的实际应用价值。对于保障食品安全以及开发石墨烯基纳米复合物的新功能具有重要意义。 * 1. 摘要 构建一种新型的磁场可控过氧化氢(H2O2)快速检测用电化学传感器。在印刷碳电极(SPCE)表面涂敷一层石墨烯(GS)/Nafion(Nf)膜，通过外磁场作用将包被了辣根过氧化物酶(HRP)的金磁微粒[Fe3O4-Au 简称：GMP]吸附到其表面构建可用于H2O2检测的一次性电化学传感器。采用X-射线衍射(XRD)、电化学交流阻抗谱(EIS)、扫描电镜(SEM)表征复合纳米材料及传感电极的制备过程；采用循环伏安(CV)法和计时-电流(i-t)法研究H2O2在该生物传感器上的电化学行为。在优化的实验条件下，该电极能实现HRP的直接电子传递(DET)，对H2O2有显著的电催化作用，在2.0×10-5～2.5×10-3 mol/L浓度范围内H2O2有良好的线性响应，线性相关系数为0.9994，检测限为1.2×10-5mol/L。该传感器灵敏快速、制备容易、样品用量少、可抛弃、外磁场可控、抗干扰性强，有望用于食品中痕量H2O2的检测。 * * 论文概况 结论 结果与性能分析 实验部分 摘要 * 2. 实验部分2-1 仪器与试剂 仪器：HI660D电化学工作站；三电极集成SPCEs(其中：工作电极为复合纳米微粒修饰电极，参比电极为印刷Ag/AgCl电极，对电极为印刷碳电极)；Hitachi S-4800N型能谱扫描电镜；X-射线粉末衍射仪；DF-101S集热式恒温加热磁力搅拌器。 试剂：辣根过氧化物酶(HRP，活性≥250 U/mg，)；石墨；过氧化氢(30%)；Nafion溶液；磷酸盐缓冲溶液(PBS，0.1 mol/L，用NaH2PO4、Na2HPO4和NaCl配制)；5 mg/mL Fe3O4/Au纳米金磁微粒；Nafion溶液及其它试剂均为分析纯；隐形眼镜护理液；实验用水均为二次蒸馏水。所有实验均处于N2保护下进行。 * 2-2实验步骤 实 验 步 骤 GS的制备 Fe3O4-Au-HRP的制备 修饰电极的制备 传感器对H2O2的检测 * 2-2.1 GS的制备 首先采用改进的Hummers法制得氧化石墨。将0.1 g GO溶解于100 mL蒸馏水，超声3 h，成为均匀分散的黄色透明GO胶体溶液。GO胶体呈亮黄色，经过氧化后已在碳原子层之间引入大量的羧基、羟基等亲水性基团而易溶于水。将上述溶液放入250 mL三颈瓶中，水浴80 ℃加热，加入50 μL肼还原24 h，最后得黑色絮状沉淀，洗涤、抽滤、真空干燥得到GS粉末。 GS在水溶液中由于∏-∏共轭以及强的分子间作