大鼠局灶性脑缺血再灌注后TACE表达变化与神经元凋亡分析.pdfVIP

摘要 背景和目的神经元凋亡在脑缺血再灌注脑组织损伤中占有重要 地位t已经证实TNF—Q、TNFR I表达上调可调节神经元凋亡；但尚 未得知在脑缺血再灌注损伤脑组织中，是否有某种内在因子调节 TNF—a／TNFR I表达，从而调控神经元凋亡。TACE／ADAMl7可水解 TNF—Q与TNFR I，由此推测，在脑缺血再灌注损伤脑组织中 TACE／ADAMl 7过度表达，可参与调控神经元凋亡过程。 方法采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉缺血再灌注模型。选 用清洁级健康雄性Wistar大鼠161只，随机分为以下各组，每组8—12 只，包括正常对照组、假手术组、缺血3h组、缺血3h再灌注3h、 5mg／Kg／次，浓度为lmg／mL，再灌注同时予以腹腔注射给药，之后给 药每1次／24h。采用半定量RT—PCR技术检测大脑皮层各部位TACE、 TNF—Q与TNFR I表达水平，同时运用TUNEL染色检测神经元细胞凋 亡。 结果 l。凋亡阳性神经元细胞主要分布在缺血半暗带区。正常对照组、 假手术组及非缺血侧仅见极少量棕色凋亡阳性神经元细胞；模型组缺 血侧在再灌注3h凋亡阳性神经元细胞数目达到最高峰(P0．01)；七 叶皂甙钠干预治疗后，缺血区凋亡阳性神经元细胞数目均减少。 ImRNA表达，而TNF—a 2．在正常对照组大鼠脑组织有TACE、TNFR I与 mRNA仅有少量表达。模型组在缺血侧和非缺血侧TACE、TNFR TNF—Q mRNA表达在脑缺血再灌注3h、 mRNA均有过度表达；TACE 12—24h达高峰(PO．01)，TNF—amRNA表达在脑缺血再灌注12h达 ImRNA在脑缺血再灌注24-48h明显过度表 高峰(P0．01)，而TNFR 达(PO．01)；七叶皂甙钠干预治疗后，各部位大鼠脑皮层TACE、TNFR I与TNF—QmRNA表达均降低(PO．01)。缺血半暗带区与缺血中心区 相比表达无差异(PO．05)，同一模型缺血侧和非缺血侧相比各指标 表达量也无差异。 3．在缺血侧TAcE、TNF—Q、TNFRI基因mRNA表达均与凋亡阳性 I基因 mRNA表达与TNF—a、TNFR 神经元细胞数目呈正相关，TACE mRNA表达也呈正相关。 结论 1．大鼠局灶脑缺血再灌注后，有TACE mRNA过度表达，其表达高 峰与凋亡神经元细胞数目表达高峰基本一致；TACE过度表达可能主 要促进神经元细胞凋亡。 2．七叶皂甙钠具有抗神经元细胞凋亡作用，机制可能与其下调 TACE、TNF—Q与TNFR I基因mRNA表达有关。 关键词脑缺血模型，TACE／ADAMl7，神经元凋亡，七叶皂甙钠 ABSTRACT and is to Background Objective：Neuronal apoptosisvery important theischemic been reperfusion has