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猪繁殖与呼吸综合征的诊断 猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种猪繁殖和呼吸障碍的传染性疾病。母猪表现为流产、早产、死产、木乃伊胎及弱仔等。仔猪和育肥猪则表现为呼吸困难。仔猪发病率和死亡率很高，对养猪业构成了重大危害。1 临床症状无忧中职教学资源网妊娠后期母猪突然出现发热（可高达40℃以上），精神沉郁，嗜睡，食欲减退，呼吸困难，有些母猪发生流产、产死胎、木乃伊胎和弱仔。仔猪临床症状明显，早产的仔猪当天或几天内死亡。初生仔猪发热，喜扎堆，拉稀，多呼吸困难，呈腹式呼吸。断奶仔猪主要表现呼吸困难、咳嗽、厌食，耳部及腹下皮肤发红，严重的耳尖发绀，病猪消瘦、贫血，最后死亡。耐过的仔猪表现生长停滞，成为僵猪。发病仔猪死亡率较高，达80%以上。无忧中职教学资源网2 病理变化剖检典型死亡病猪，主要表现为血液稀薄呈水样，淋巴结出血，肺脏水肿、充血、出血，有坏死灶，主要表现为间质性肺炎;肾肿大，有小出血点;肝脏肿大呈黄褐色;肠粘膜出血，肠系膜淋巴结水肿;部分在喉头、心外膜、膀胱粘膜有点状出血。流产胎儿及弱仔剖检，可见头部、皮下水肿，胸腔内积有大量清亮液体。根据上述症状和剖检变化初步诊断为猪繁殖与呼吸综合征。为了进一步确诊，又进行了下列实验室检查。3 实验室诊断3.1 分子生物学诊断无忧中职教学资源网我们采用RT～PCR的诊断方法：取PRRS病料（肺、淋巴结）组织研磨：应用TRIZOL细胞裂解液，按常规方法提取RNA;用下游引物进行反转录;用反转录产物cDNA进行PCR扩增（上游引物5′GCGGATCCATGCGATCTAACAAC3′;下游引物5′AGCGCGAGTCAGGCTAGGGAGGA3′），PCR反应条件为：94℃预变性3min，94℃变性1min，53℃退火1min，72℃延伸1min，30个循环后，72℃再延伸10min。反应结束后，取PCR产物5μL在1%的琼脂糖凝胶中进行电泳。结果扩增出大小为417bp左右的目的片段，与预期扩增417bp大小的片段相符。3.2 血清学诊断我们使用华中农业大学动物医院动物病毒室研制的猪蓝耳病抗体检测试剂盒检测了10份病猪血清。具体方法是将病猪血清用样品稀释液按1∶40稀释后，每孔加100gL;再用稀释液按1∶4稀释阴、阳性对照，各设2孔，每孔100μL;另设一孔空白对照，加100μL稀释液。37℃温育30min，甩掉板内溶液，用洗涤液洗涤5次，每孔加酶标二抗100μL，37℃温育30min。然后洗涤，加入显色液显色。测得待检样品的OD630值分别为：0.44， 0.46，0.50，0.48，0.46，0.52，0.55，0.49，0.53，0.47。测得值大于0.42就可判定为阳性，因此可以确诊该病为猪繁殖与呼吸综合征。4 防治措施4.1 加强饲养管理对发病猪立即进行隔离和淘汰。淘汰发病严重的病猪，发病轻微的猪隔离治疗。及时对猪舍环境进行清洗、消毒，保持猪舍饲养用具的清洁卫生。对流产母猪的胎衣，死胎及死猪及时进行无害化处理。产舍进行彻底消毒。对体弱病猪补充足够的蛋白质和饲喂高能饲料，对腹泻病猪用口服补液法补充适量电解质。4.2 疫苗免疫接种对断奶仔猪和育成猪立即接种猪繁殖与呼吸综合征弱毒疫苗，每头2mL;对繁殖母猪接种灭活苗，每头4mL。间隔3周后进行加强免疫，以后每隔5个月接种1次。4.3 药物防治由于繁殖与呼吸综合征没有特效药物治疗，只能进行辅助治疗，所以可用链霉素给妊娠后期母猪拌料饲喂，以防止继发感染，同时加强饲料营养和日常管理。5 讨论无忧中职教学资源网本次疫病根据流行病学，临床症状，病理变化和实验室诊断最后确诊为猪繁殖与呼吸综合征。猪繁殖与呼吸综合征是由繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种免疫抑制性传染病，各种年龄的猪均易感，且不同年龄的猪感染后症状差别较大。繁殖与呼吸综合征病毒能够破坏猪体的免疫防御系统引起免疫抑制，猪感染后抵抗力降低，而易继发其他疾病，如附红细胞体病，猪二型圆环病毒病等，因此给本病的诊断带来了很大的困难，往往造成误诊，结果使疫情不断扩大，给养猪场造成严重的经济损失。该猪场此次发病，由于确诊及时，采取疫苗免疫接种和药物防治相结合的方法，使疫情很快得到控制，3个月后该场未有本病发生。