梨叶片离体培养和植株再生 - 园艺学报.PDF

园　艺 　学 　报 　2002 , 29 (4) : 367～368 Acta Horticulturae Sinica 梨叶片离体培养和植株再生 1 1 2 1 2 徐凌飞 　马锋旺 　王　之 　任小林 　曹晓雁 (1 2 ) 西北农林科技大学园艺学院 , 杨凌 712100 ;　 陕西师范大学生命科学学院 , 西安 710062 摘 　要 : 用梨 ( Py rus) 4 个栽培品种的叶片诱导不定芽 。暗培养 20 d , 取试管苗顶部幼嫩叶片 , 远轴 面向下接触培养基 , 叶片再生效率高 。八月红品种的叶片再生效率高于其它 3 个品种 。在 NN69 + TDZ 1. 0 mg/ L + IBA 0 . 5 mg/ L 培养基上 , 八月红梨叶片再生频率为 100 % , 平均再生芽数为 5. 78 。八月红梨和水晶 梨叶片再生苗在附加 IBA 的 1/ 2MS 培养基上生根 。 关键词 : 梨 ; 叶片培养 ; 植株再生 中图分类号 : S 661. 2 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 0513353X (2002) 1 　目的、材料与方法 〔1 ,2 〕 梨叶片再生效率普遍较低 。作者通过对影响梨叶片离体再生的若干因素的研究 , 建立梨叶片 再生体系 , 为梨树无性变异体筛选和遗传转化研究奠定基础 。 ( ) 以中国梨主栽品种八月红 、砀山酥 、早酥 、水晶 新高芽变 梨试管苗为试材 , 取继代培养 30 ～40 d 的试管苗顶部叶片 , 去叶柄 , 垂直叶中脉横切伤 3 刀 , 接种在再生培养基上 , 首先暗培养 , 然 后转移到培养架上培养 。叶片再生基本培养基为 NN69 〔3 〕, 此培养基为正交试验筛选出的 NN69 + BA 5. 0 mg/ L + IAA 0 . 5 mg/ L , 附加蔗糖 30 g/ L , 琼脂6 . 0 g/ L , p H 5. 8 ( ) 激素试验除外 。每瓶接种 3 个叶片 , 随机区组试验设计 , 每处理 6 瓶 , 重复 1～2 次 。叶片接种后 60 d 统计再生效率 , 并对结果 进行方差分析 , 显著水平为 0 . 05 。将诱导出不定芽的叶片接种于 MS + BA 0 . 5 mg/ L + IBA 0 . 2 mg/ L 的生长培养基上 , 培养 30 d 后将不定芽发育成的新梢切成 2 ～3 cm 茎段 , 转入生根培养基 。每品种 ( ) 接种茎段 30 个以上 。培养温度 25 ±2 ℃, 光照强度 2 000 lx , 光照时间 14 h/ d 。 2 　结果与分析 2 . 1 　暗培养时间对梨叶片再生的影响 表 1 　不同暗培养时间对梨叶片再生的影响 暗培养可以显著提高水晶梨叶片的再生频率 , Table 1 　Eff