H,TA-HSP70,BCG冲激的小鼠骨髓树突状细胞的生物学活性变化及分析.pdfVIP

HTA-HSP70BcG冲激的小鼠骨髓树突状细胞 的生物学活性变化及分析 硕士研究生：崔向丽 指导教师：施广霞 教授 专业名称：病理学与病理生理学 摘 要 树突状细胞(dendritic cells，DC)在体内抗原提呈方面起重要作 用。树突状细胞分化发育过程中存在2个不同阶段，未成熟的DC具 有摄取、处理抗原的能力，一旦发育为成熟DC，抗原捕获能力减弱． 却变成刺激静息淋巴细胞、激活初次免疫应答的抗原提呈细胞。抗原 多肽与HSP70 瘤细胞生长。本研究室分别制备榄香烯复合瘤苗抗原(IITA)与卡介苗 的攻击具有明显的保护效应。 髓DC，观察DC的抗原捕获能力、抗原提呈功能等变化。分析探讨 HTA．HSP70BcG体外冲激对DC生物学活性的影响及可能机制。 方法：无菌取小鼠胫骨和股骨，用PBS冲洗髓腔，用含有GM—CSF 天，收集DC及其培养上清，分别用ELISA法和一氧化氮(N0)硝酸还 原酶法测上清中IL．12和NO的浓度。用流式细咆仪测内吞FITC标记 不粘附细胞的增殖指数、DC对HCa，F增殖的抑制率受活化的脾脏不粘 附细胞对HCa．F的杀伤活性。 结果： 组之间无显著差异(PO．05)，其他各组之间均有显著性差异(PO．05)。 对照组Dc摄取率明显高于冲激组，而以HT^一HsP70。冲激组Dc摄取率 最低。 2．不同冲激的DC对HCa-F的生长增殖抑制作用：按照效靶比1： 冲激组DC的抑制作用最强。 3．不同冲激的DC对脾不粘附细胞的激活作用：对照组DC刺激 激脾不粘附细胞增殖的能力，冲激组增殖指数明显高于对照组DC DC的2倍。 4．活化的脾不粘附细胞对活化HCa—F的杀伤率：按照效靶比1： 组，冲激组DC活化的脾不粘附细胞对HCa．F的杀伤率明显高于对照 组DC组(P0．05)。而以HTA．HSP70BcG组杀伤率最高。 (P0．05)，冲激组的NO浓度明显高于对照组DC组，而以 HTA—HSP70BCO组NO浓度最高，约为对照组DC的12倍。 ·· 浓度最高，为对照组DC的36倍。 鼠骨髓DC的成熟，并且冲激后的Dc可以刺激脾不粘附细胞的活化与 增殖，活化后的脾不粘附细胞可以杀伤HCa—F细胞。刺激成熟的DC培 养上清中IL-12和NO浓度明显高于对照组Dc的培养上清，二者可以 抑制HCa—F的增殖，No具有细胞毒活性，可以杀伤HCa—F细胞，因此 H，．-HSP70。冲激的DC有可能成为有效的肿瘤疫苗。 关键词：树突状细胞热休克蛋白 卡介苗抗原提呈抗瘤免疫 The of Mice bioactivity Marrow-Derived change Dendritic Cells Pulsedwith HTA-HSP70BcG Postgraduate：Cui xiangli Shi Supervisor：Professor guangxia and Major：Pathology Pathophysiolog、， Abstraet Dendritic inthe