微囊藻毒素的酶联免疫法分析影响因素探讨.pdfVIP

环境污染与防治 第 34卷 第 4期 2012年4月 微囊藻毒素的酶联免疫法分析影响因素探讨 张 琳 李晶晶 。 高庚 申 (1．贵州省环境科学研究设计 院，贵州 贵阳 550002； 2．贵州省水污染控制与资源化技术研究重点实验室，贵州 贵阳 550002； 3．贵州师范大学地理与环境科学学院，贵州 贵阳 550001) 摘要 考察样品与抗微囊藻毒素 (Mc)LR的单克隆抗体 (单抗)加人间隔时间、温育温度、检测时间、pH、H2O2、Fe2+等不同 因素对酶联免疫法 (ELISA)测定 MC-LR的影响 。结果表明：(1)随着样 品与单抗加人 间隔时间延长 ，MC—LR测定值逐渐降低 。(2) 25、37。C下 ，MC—LR测定值几乎没有差别 ，测定结果与取用标准样品具有很好的一致性 。(3)不同检测 时间下 ，无论是低浓度还是 高浓度标准样 品，MC-LRN9定值均有一定变化，虽然幅度均不大，但仍然建议终止反应后尽快 比色。(4)当 pH为 7～9时，MC—LR 测定值变化不大。(5)当 H202摩尔浓度为0．1、1．0、10．0rnmol／L时，均会对 ELISA产生干扰 。通过水浴去 除H202后 ，H202初始 摩尔浓度分别为0．1、1．0mmol／L时，MC—LR 回收率分别达到 87 及 81 。(6)Fe 对酶有显著 的抑制作用 ，可通过沉淀过滤 的 方式消除干扰。 关键词 微囊藻毒素 酶联免疫分析 影响因素 Studyontheinfluentialfactorsinthedetectionofmicrocystinsbyenzymelinkedimmunosorbentassay ZHANGLin ， LIJingJing 。，GAO Gengshen 。．(1．GuizhouInstituteofEnvironmentalSciencesResearch Design，Guiyang Guizhou550002；2．CruizhouKeyLaboratoryof WaterPollutionControl ResourceReuse，GuiyangGuizhou 550002；3．GuizhouNormalUniversity，CollegeofGeography EnvironmentalSciences。GuiyangGuizhou550001) Abstract： Theenzymelinkedimmunosorbentassay (ELISA)wasemployedtodetectmicrocystins(MC)．The effectofMC—LR andit’Smonclonalantibodyadditionintervals，incubationtemperature，detectiontime，pH ，H2O2and Fe onthedetectionresultswasinvestigated．ResultsshowedthattheMC-LRdetectionvaluewasdecreasedwithin— creasingtheMC—LR addition intervals．Whentheincubationtemperatureswas25，37℃ ，theMC—LR detectionvalue wasalmostthesame；thedeterminationresultsandstandardsamplehadverygoodconsistency．TheMC—LR determ i— nationvaluehadcertainchangeforbothlow concentrationandhighconcentrationstandardsamples，althoughthevari— ationwasnotbig，itwasstillrecommendtOcarrythecolorimetricanalysisassoon aspossible．pH (7-9)hadlittle effectonELISA；ELISA wasdisturbedwhenH2O2was0．1，1．0，10．0mmol／L．Therecoveryofmicroc