唑来膦酸及其与多西他赛联合运用对前列腺癌PC--3细胞体外作用的实验研究.pdfVIP

唑来膦酸及其与多西他赛联合运用对前列腺癌PC．3细胞体 外作用的实验研究 摘 要 目的和研究背景： 前列腺癌是男性泌尿生殖系统常见肿瘤之一，在美国占男性肿瘤死亡率第二 位，近年来在我国的发病率和死亡率也是逐年升高。前列腺癌是对雄激素依赖的 肿瘤，所以大多数前列腺癌患者刚开始对于祛除雄激素治疗有效，但约50％一60％ 患者在接受内分泌治疗后的18—24个月后会转变成为激素难治性前列腺癌 (Hormone cancer，HRPC)。 refractoryprostate 而HRPC患者骨转移的发生率高达65—75％，骨是最易产生远处转移的组织。 唑来膦酸(zoledronicacid，ZOL)是目前唯一被证实能减少前列腺癌骨转移以 及骨相关事件发生率，并能持久缓解疼痛的双磷酸盐药物。通过研究发现，唑来 膦酸不但能通过抑制破骨细胞的活动和增殖，对抗肿瘤细胞的骨转移，还有直接 抑制肿瘤细胞生长的作用(乳腺癌、骨肉瘤等肿瘤细胞)。目前，晚期前列腺癌患 者的治疗一直是困扰临床泌尿外科的一个难题，而唑来膦酸对肿瘤细胞的增殖抑 制作用的特性，无疑为临床治疗HRPC患者提供了新的思路，它与目前公认的HRPC 了人们关注的课题。 目前国内外相关领域的研究尚处于基础研究阶段。国外部分研究已证实，唑 来膦酸主要通过甲羟戊酸途径起到抗肿瘤的作用。而对唑来膦酸和多西他赛联合 用药的基础研究则更少。两者联合运用于乳腺癌细胞的研究提示其具有协同抗肿 瘤作用，而对于前列腺癌的作用在最新的肿瘤学杂志上也开始出现零星的报道 (hcta Onlocogia)，但资料还是非常有限。 本研究的目的正是为进一步验证唑来膦酸对激素非依赖性前列腺癌PC一3细 胞系的抗肿瘤作用，同时探讨唑来膦酸与多西他赛联合应用于PC-3细胞是否具有 协同作用，并通过对被抑制肿瘤细胞的细胞周期分布的影响，来揭示其抗肿瘤作 用的可能机制，为临床治疗提供理论依据。 方法和结果： 1．MTT比色法观察ZOL对前列腺癌PC-3细胞的增殖抑制作用 u 本部分研究用不同浓度的ZOL(6．25g／ml一400“g／m1)作用于体外培养的 PC-3细胞，药物作用2小时后，换J下常细胞培养液继续培养，在72小时后采用噻 u 增殖，这种作用随着药物浓度的增加而增强。在100 g／ml的浓度下，PC一3细胞 6 u lI 抑制率达到19．O％，在200g／ml浓度下抑制率达到44．5％，而400g／ml浓度时则 达到了57．9％。光镜下观察到细胞浓度明显降低。 2． 作用 继续培养48小时后采用噻唑兰(MTT)比色法检测细胞增殖活性。结果表明，ZOL 与DOC具有联合抑制细胞增殖的作用，在DOC浓度条件不变情况下，这种增殖抑 u 制作用随着ZOL药物浓度的增加而增强。在lOng／ml浓度DOC条件时，200g／m1 u 浓度ZOL可抑制49．3％的PC-3细胞，400 u II 浓度的DOC条件时，200 g／ml时 g／m1浓度ZOL的细胞抑制率达到59．7％，400 抑制率达到74．2％。光镜下细胞密度明显降低，且伴有细胞质减少的表现。 3．流式细胞仪检测Pc一3细胞周期的分布变化 本部分研究将PC-3细胞接种于6孔板内培养，过夜贴壁后，用不同浓度的ZOL 作用2h，换正常培养液继续培养72h。胰酶消化处理后收集