小鼠卵丘细胞自体与异体核移植的探索.pdfVIP

中文摘要 本研究共分3个部分。首先是建立常规的小鼠体细胞核移植方法，具体以B6D2F1小鼠卵丘 细胞作为核供体，用piezo操作系统把PVP处理的供体细胞核直接注入去核的同品系小鼠MII 卵母细胞质中获得重构胚胎，用SrCI。激活后，再用CZB溶液培养至囊胚阶段。在此基础上， 设计了下面的两组实验：a、把同一只小鼠的卵匠细胞核注射剑同一只小鼠的去核卵母细胞内(简 称自体克隆)；b、把一只小鼠的卵丘细胞注入另一只小鼠的去核卵母细胞内(简称异体克隆)， 然后比较两种重组胚的体外发育能力。结果发现，自体克隆与异体克隆胚胎形成原核的比例 (83．2％，89．9％VS 95．8％)和卵裂比例(98．4％，93．6％vs98，蝴与孤雌激活对照问没有筹异 (pO，05)。继续培养发现，自体和异体克隆胚胎发育至4一细胞(82．9％，80．8％VS95．7％)、桑 椹胚(75．2％．70．4％vs92．8％)、和囊胚(31．8％，25．6％VS72．5％)阶段的比例显著低于对照组 (pO．05)；两种处理间未见任何差异(pO．05)。最后，进行了克隆胚胎的输卵管和子宫移植， 其中自体克隆组移植了77枚原核胚和37枚囊胚，，异体克隆组移植了68枚原核胚和28枚囊胚， 均无克隆小鼠出生。初步结果表明，核／质基因型的相同与否不影响克隆胚胎的体外发育能力， 对克隆胚胎继续发育的影响还需深入的研究。 关键词：核移植，小鼠，卵丘细胞 Abstract Inthecurrentthesis．themouse wasestablished nucleifrom cloningtechnique firstly．The edultmicewereintroducedintoenucleated somatic from cells(cumuluscells，CCs)taken OOC”es strainandthereconstructedwereactivated andculturedwithCZB B6D2F1 embryos bySrCl2 for in theeffectofdifferentsourcesofCCs medium vitro．Secondly,weinvestigated development self-ordifferentindividual or cloned from donor(SlDDID)onembryonicdevelopment．The at inthetwo shownno various their developmental embryos groups potency stages(p0．05)，while rateatthe developmental4-c(82．9％，80．8％vs95．7％)，morula(75．2％，70．4％vs92．8％)and of were lowerthanthatthe 1．8％，25．6％vs72．5％)stagessignificantly parthenogenetic blastocyst(3 of