溶剂对蛋白质ESI-MS带电分布的影响.pdfVIP

溶剂对蛋白质ESI_MS带电分布的影晌 专业：药物分析 硕士生： 徐珠元 指导老师：邓慧敏副教授 摘 要 生物质谱的发明给生物大分子分析带来了一场革命，MALDI和EsI均能将热 Ms是最软的离子化方法。ESI—MS能将样 不稳定的生物大分子离子化。其中EsI 品溶液通过毛细管导入大气压电离源内，在源内毛细管终端和反电极之问的强电 场作用下，使样品形成带电荷的雾滴，即发生电喷雾而被离子化并进入质量分析 器。ESI能连接四极杆、离子阱和飞行时间等多种质量分析器。EsI串联质谱可 自发明以来，被广泛的应用于分析有机化合物，高分子和生物大分子。高分子质 量的蛋白质在ESI—MS分析中，可形成甚至带十个以上电荷的离子峰簇，因此在有 析条件下电离产生电荷分布不同的多电荷离子峰簇。一般的研究表明，ESI—Ms 中某些一级结构类似的蛋白质带电分布差别巨大，变性蛋白比天然蛋白带有更多 的电荷。又有研究表明溶液的pH值对蛋白质的带电分布影响非常小。优化好的 溶剂条件有利于获得带电荷数少，电荷分布集中的质谱图。本文使用电喷雾离子 阱质谱仪，通过在水+甲醇、水+乙腈和水+异丙醇三组溶剂中以及在不同的溶剂 配比浓度下对细胞色素C(牛心)、胰岛素(牛)进行ESIMS分析，发现不同的 溶剂组对蛋白质离子主要带电荷的数量有明显的影响。而在同一溶剂组中，溶剂 的配比则对蛋白质离子的带电分布范围有影响。由此可以得出结论，ESI—Ms中 蛋白质的带电分布跟气相状态下溶剂分子与蛋白质的相互作用有关。同时，本文 还发现．在某些情况下，加入少量(2％)的异丙醇有助于获得带电荷数较少的蛋白 质ESI—MS谱图。 关键词：溶剂影响 电喷雾质谱带电分布蛋白质 Protein E什ectofSolventon StateDistributionof Charge lonsProducedESI—MS by Pharmaceutical Major： Analysis Name： Xu Zhuyuan Associate Huimin Supervisor： professorDeng Abstract of Mass resultsarevolution ThediscoveryBiologicalSpectrometry the molecules．MALDIandESIcanmake in analysisofbi0109ical Both moleculesionized．ESIisthesoftestionization．In biological softly ESI—MSthe of ofl isused techniqueelectrohydrodynaⅢicsprayingiquids to ionsfrom ina diluted sampleⅢolecules