玉米ZmCKX1基因的表达分析和遗传转化研究.pdfVIP

摘要 细胞分裂素是植物生长过程中的一类重要激素，细胞分裂素氧化酶通过移除细胞分 裂素的N6一异戊二烯链产生一个腺嘌呤和一个相应的不饱和的乙醛一3一甲基一2一丁烯醛， 不可逆的降解细胞分裂素而调控植物的生长发育。本文根据GenBank数据库中OsCKX2 的基因序列设计引物，利用RT-PCR技术克隆得到从玉米自交系郑58中克隆了编码细 胞分裂素氧化酶l(ZmCKXI)的基因。选取授粉前后不同时间点的玉米自交系及其杂 交后代的雌、雄穗，通过荧光定量PCR方法，分析ZmCKXl基因的表达分析。并构建 了ZmCKXl基因的过表达和RNA干扰载体，进行了玉米幼胚的遗传转化，主要研究结 果如下： 1、ZmCKXl基因阅读框全长为1608 kd， bp，编码535个氨基酸，蛋白质分子量为57 49％。 2、ZmCKXl基因主要表达在雌穗中，并且随着授粉时间的延长，ZmCKXI在雌穗中 的表达量逐渐升高，在授粉后30d达到最高，是雌穗10d的5倍，雌穗0d的50倍。 并且杂交种中ZmCKXI的表达量明显低于亲本，ZmCKXl的表达分析表明：产量越高， ZmCKXl表达量越低。这表明ZmCKXl的表达水平与玉米的生长活力及产量是负相关 的。 幼胚，利用抗性基因Hpt和目的基因PCR检测再生的小苗，结果表明，ZmCKXl已经 插入到了植物基因组中，共获得30棵ZmCKXl转化植株。 关键词：ZmCKXl基因，载体构建，荧光定量PCR，RNA干扰，玉米幼胚 ABSTRACT and in development- an role growth that plant hormones important are plant play important Cytokinins theirN6-subs‘im‘ed CKs remoVing The irreversiblyby oxidase／dehydrogenase(CKX)degrades cytokinin anda unsaturated chainto aIladeninecorresponding isoprene produce leveland in thelocalCK subse(1uently is to anessentialrolecontrolling CKX thoughtplay enz)，nle newcDNA of inplanta．The 8equence to of processes the cytokinin．dependent