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第12章微生物的分类鉴定
特异性的探针主要用于 病原微生物的快速鉴定 四、其它 血清学试验、噬菌体分型、生态特性、氨基 酸顺序和蛋白质分析、对细胞壁等细胞成分 的分析比较、通过原核生物的转化、转 导、接合来判断原核生物的亲缘关系等等。 BIOLOG自动微生物鉴定系统 * * 第十二章 微生物的分类和鉴定 形成于35亿年前的微生物化石 主要是些类似简单杆状细菌的原始生物 形成于8.5亿年前的微生物化石 20亿年前以后的岩石中的微生物的化石形态多样性明显增多 形成于10亿年前的微生物化石 形态上非常类似于现代的蓝细菌, 进行不产氧光合作用的光能自养 菌,及化能无机营养的硫细菌。 形态上类似于现代的绿藻(真核生物) 今天仍生存在地球上的生物种类, 彼此之间都有或远或近的历史渊源。 最原始的生命 漫长的进化历程 千姿百态的生物种类 生物分类的二种基本原则: a)根据表型(phenetic)特征的相似程度分群归类,这种 表型分类重在应用,不涉及生物进化或不以反映生 物亲缘关系为目标; b)按照生物系统发育相关性水平来分群归类,其目标 是探寻各种生物之间的进化关系,建立反映生物系 统发育的分类系统。 从进化论诞生以来,已经成为生物学家普遍接受的分类原则 生物系统学(systematics) 进化的测量指征 rRNA作为进化指征 ⑴ 生物功能:rRNA参与蛋白质的合成。 ⑵ 分子结构:序列中既存在高度保守的区域,也存在高度变化区域。其中16S rRNA大小适合,操作方便。 ⑶ 数量与分布:数量大,普遍存在于原核和真核生物中。 利用16S rDNA序列对微生物进行鉴定 利用16SrRNA建立分子进化树的美国科学家 Carl Woese 微生物的16Sr DNA序列具有进化上的保守性,因此可作为分类的良好依据。 基于16S rDNA序列同源性的脱氮细菌系统发育树 培养微生物 提取基因组DNA rRNA序列测定 分析比较 微生物之间的系统发育关系 16S rDNA微生物鉴定流程 PCR扩增16S rDNA片段 第一节 细菌分类 分类是认识客观事物的一种基本方法。我们要认识、 研究和利用各种微生物资源也必须对它们进行分类。 分类(classification):根据一定的原则(表型特征相似性或系统发育 相关性)对微生物进行分群归类,根据相似性或相关性水平排列成 系统,并对各个分类群的特征进行描述,以便查考和对未被分类的 微生物进行鉴定; (根据现有数据建立系统的过程) 分类学涉及三个相互依存又有区别的组成部分: 鉴定 分类、 命名、 命名(nomenclature):是根据命名法规,给每一个分类群一个专有 的名称; (分类系统建立过程中的步骤之一) 鉴定(identification或determination):借助于现有的微生物分类 系统,通过特征测定,确定未知的、或新发现的、或未明确分类 地位的微生物所应归属分类群的过程。 (根据现有系统确定未知微生物分类归属的过程) 主要以细菌为例介绍微生物分类、命名和鉴定的有关知识 常用的细菌分类学术语: 1)培养物(culture):一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长 物。如微生物的斜面培养物、摇瓶培养物等。 2)菌株(strain):从自然界中分离得到的任何一种微生物的纯培养 物都可以称为微生物的一个菌株;用实验方法(如通过诱变) 所获得的某一菌株的变异型,也可以称为一个新的菌株, 以便与原来的菌株相区别。 菌株是微生物分类和研究工作中最基础的操作实体 一、分类单元及其等级 Bacillus subtilisASI.398 Bacillus subtilisBF7658 生产蛋白酶 生产α淀粉酶 3)型(form或type):常指亚种以下的细分。当同种或同亚种不同菌 株之间的性状差异,不足以分为新的亚种时,可以细分为不同的型。 例如抗原特征的差异分为不同的血清型;对噬菌体裂解反应的 不同分为不同的噬菌型等。 4)种(species): 物种,生物分类中基本的分类单元和分类等级。 高等生物中,“生殖隔离”被看作是区分物种的标准。 微生物的种:具有高度特征相似性的菌株群,这个菌株群与其 他类群的菌株有很明显的区别。 伯杰氏手册 《伯杰氏鉴定细菌学手册》 (Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology) 美国宾夕法尼亚大学的细菌学教
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