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辣椒种子纯度 SSR分子标记鉴定技术规程 编制说明 沈阳市农业科学院 2017年月 图2 沈椒4号的种皮与种子DNA的SSR标记 3. 纯度检测 选择上述1对差异引物对48粒种子样品进行检测，通过PCR及电泳，获得凝胶照片，见图3。 图3 沈椒4号纯度检测电泳结果 结果见图，从图可见，第2粒为亲本、第37粒为外源杂。 4. 不同品种进行验证 利用上述方法，分别检测某大牛角（图4）、某甜椒品种（图5），经验证该方法可用于检测不同类型辣椒品种的纯度。 图4 大牛角纯度检测电泳结果 图5 甜椒纯度检测电泳结果 综上，上述方法可以实现检测的简易化、规范化和标准化。调查资料及检测结果也显示，此检测方法有重复性好且操作简单等诸多优势，能够解决辣椒种子商品化过程中问题，可预见该检测技术的推广使用具有很大的社会经济效益。 四、国内外现行相关法律、法规和标准情况； 随着辣椒杂种一代种植面积的不断扩大，品种的种子纯度问题显得尤其重要。在生产实践中，常常出现因种子纯度不高造成产量降低、品质变劣，商品性不好，严重影响经济效益。因此，大力开展辣椒种子纯度检测工作显得尤其重要。目前，国内辣椒纯度检测主要参考标准GB/T 3543.5-1995，该标准主要通过种子、幼苗、植株的形态上的差异来鉴定，时间长且准确度差。近年来，随着分子标记技术的不断发展和完善，基于DNA水平的辣椒种子纯度检测工作得到长足发展，本标准采用SSR分子标记技术鉴定辣椒种子纯度，该方法与常用蛋白质标记技术或其他DNA分子标记相比，在鉴定辣椒种子纯度上有稳定、清晰、高效的优势，有利于检测技术的进一步推广应用。 五、重大意见分歧的处理结果和依据； 无 六、提出标准强制实施或推荐实施的建议和理由； 辣椒种子纯度检测是种子管理部门、辣椒种子生产单位、经营部门的日常业务和控制质量的关键环节之一。随着辣椒杂种一代种植面积的不断扩大，品种的种子纯度问题显得尤其重要。在生产实践中，常常出现种子纯度不高、活力下降，造成产量降低、品质变劣，严重影响其经济效益。因此，大力开展辣椒种子纯度检测工作显得尤其重要。本标准制定的辣椒杂交一代种子纯度SSR分子标记鉴定技术规程操作相对简便、结果稳定可靠、检测精准度高的技术方法，实用性强、适用性广，建议批准发布为地方标准，推荐有关单位和部门使用。 七、贯彻地方标准的要求、措施及标准实施时间的建议，强制性标准还应说明实施过渡期的理由； 由于标准中涉及的DNA提取技术、PCR技术、电泳技术专业性较强，操作者需具备一定的专业理论及掌握相关实验操作技术。因此，如条件允许，标准实施过渡期组织开展相关培训活动，提高检测人员的操作水平，使该标准得到推广应用。 八、其他应予说明的事项。 无