柱状田头菇原生质体制备条件的实验研究.pdfVIP

第30卷 第4期 河 南 科 学 Vo1．30 No．4 2012年 4月 HENAN SCIENCE Apr．2012 文章编号：1004—3918(2012)04—0440—04 柱状 田头菇原生质体制备条件的实验研究 周伏忠L， 陈晓飞L， 孙玉飞2， 宁 萌 ， 陈国参 1,2 (1．河南省微生物工程重点实验室，郑州 450008： 2．河南省科学院生物研究所有限责任公司，郑州 450008) 摘 要：对影响柱状田头菇菌株原生质体制备的条件进行了研究，这些条件包括不同的培养基 、不同的温度 、不 同的pH、不同的酶解时间、不同的菌龄以及不同的渗透压稳定剂．结果表明：液体摇瓶振荡培养5d的菌丝，以 0．6mol／L的甘露醇或MgSO作为渗透压稳定剂，采用2％的真菌溶壁酶，在pH为6、温度为31℃的条件下酶解2h， 柱状田头菇菌株的原生质体制备率最高，可达到2．3lxl0个m／L． 关键词：柱状 田头菇：原生质体；制备 中图分类号：O939．9 文献标识码：A StudiesonPreparationofProtoplastofAgrocybecylindraceaStrain ZhouFuzhongII2， ChenXiaofeil．2’ SunYufei， NingMeng， ChenGuocan， (1．HenanKeyLaboratoryofMicrobialEngineering，Zhengzhou450008，China； 2BiologyInstituteCo，Ltd．HenanAcademyofScience，Zhengzhou450008，China) Abstract：Inthispaper，theprotoplastpreparationconditionsofAgrocybecylindraceastrainwerestudied，these conditionsincludedifferentmedia，differenttemperatures，differentpH，differentreaction time，differentmycelial ageanddifferentosmoticstabilizers．Theresultsshowedthat：afterthemycelium culturedfor5daysinliquid oscillation shaking，with 0．6mol／L mannitolorMgSO4asosmotic stabilizer，and aconcentration of2％ ofthe fungalwalldissolvingenzyme (1ywallzyme)inthepH6．0，temperature31 for2hoursreactiontreatment，the yieldofprotoplastofAgrocybecylindraceastrainwashighestandcanreach2．3lxl0／mL． Keywords：Agrocybecylindracea： protoplasts； preparation 柱状 田头菇 (Agrocybecylindracea)又名茶薪菇、杨树菇，是一种食、药兼用的大型真菌，富含蛋白质、氨 基酸和维生素，其多糖对小 白鼠肉瘤和艾氏腹水癌有明显抑制作用，医学价值显著_12】；柱状 田头菇 口感脆嫩， 很适合干销和鲜销，近年来在河南省栽培面积不断增加．然而，柱状 田头菇现有栽培品种抗杂抗逆表现不 甚理想，生物学效率也还比较低 (6O％～85％)，制约了柱状 田头菇栽培效益的提高和发展 ． 食用菌原生质体育种不受栽培周期和种属胞壁限制，不仅能缩短育种周期，而且还可以进行种属间远缘 杂交，是食用菌提高单产和品质的重要手段l3—81．本实验对柱状 田头菇原生质体制备条件进行了系统研究，以 期为柱状阳头菇的原生质体诱变和杂交育种 以及新品种选育打下基础． 1 材料与方法 1．1 材料 1．1．1 菌株 柱状田头菇，河南省微生物工程重点实验室保存 ． 1．1．2 培养基 1)