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人单核细胞趋化蛋白Elisa试剂盒.pdf
人 MCP-1 定量分析酶联免疫检测试剂盒
本试剂盒仅供科研使用。用于体外定量检测人血清、血浆或细胞培养上清液中的 MCP-1 浓度。使用前请仔细阅
读说明书并检查试剂组分是否完整, 如有疑问请与北京博凌科为生物科技有限公司联系,我们将提供力所能及的帮
助。 如您有其它需求,请登录北京博凌科为生物科技有限公司网站或致电本公司。
MCP-1简介:
单核细胞趋化蛋白 1(MCP-1/CCL2),也被称为单核细胞趋化与激活因子(MCAF),是单核细胞和 T 細胞及 NK 細
胞的激活因子,属于趋化因子家族 CC 亚族一个成员。人 MCP-1 cDNA 编码 99 个氨基酸组成的前体蛋白,成熟蛋白只
有 76 个氨基酸,是前体蛋白被酶切掉 23 个氨基酸疏水性信号肽形成的。
MCP-1 被认为在与单核细胞渗透相关的许多疾病有关,包括动脉粥样硬化、类风湿性关节炎和过敏反应等。几例
体外动物模型实验表明 MCP-1 在炎症反应的过程中扮演着重要的角色。MCP-1 也被证明在包括胃癌、食管上皮磷癌、
恶性胶质瘤、卵巢癌、胰腺癌、膀胱癌和乳腺癌的调控中起作用。
体内分泌 MCP-1 的细胞有:单核细胞、肥大细胞、T 细胞、成骨细胞、成纤维细胞、内皮细胞、表皮细胞、小胶
质细胞、星形胶质细胞及平滑肌细胞等。
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中MCP-1的浓度。MCP-1捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本
或参考品时,其中的MCP-1会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人MCP-1
抗体后,抗人MCP-1抗体与MCP-1接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入
辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;
其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在MCP-1将会形成免疫复合物,辣根过氧化物
酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,MCP-1浓
度与OD 值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中MCP-1 浓度。
450
人定量分析酶联免疫检测试剂盒组成:
组分 规格
预包被板 12条 或 6条
样本分析缓冲液 1瓶5ml/3 ml
标准品稀释液 10ml/5ml
标准品 4/2支(冻干)
生物素化抗体 1瓶10ml/5ml
HRP连接的酶结合物 1瓶10ml/5ml
浓缩洗涤液 20× 30ml/瓶
TMB底物 1瓶10ml/5 ml
终止液 1瓶5ml/3 ml
封板胶纸 3/2张
说明书 1份
标本收集:
1.标本的收集请按下列流程进行操作:
A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;
B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集;
D.若待测样本不能及时检测,标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
BeijingBLKW BiotechnologyCo.,Ltd. Tel:01052872342 blkwbio@
3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:
1.试剂盒请保存在2~8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶,请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后,请在三天内用完。
4.底物请勿接触氧化剂和金属。
5.加样时,请及时更换枪头,避免交叉污染。
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