杞菊地黄丸浓缩丸的质量分析.doc

杞菊地黄丸（浓缩丸）的质量分析 实验仪器：锥形瓶、5ml量瓶、50ml量瓶、量筒、高效液相色谱仪、UV 2101P C紫外可见分光光度计、超声波振荡仪、紫外二极管阵列检测器、0. 45μm 微孔滤膜、紫外灯 实验试剂：甲醇、甲酸、甲苯、乙醚、乙腈、乙酸乙酯、丙酮、二氯甲烷、浓氨试液、重蒸馏水 ( 临用前制备)、冰醋酸、环己烷 、水饱和正丁醇、0.1%磷酸溶液、0.3%磷酸溶液、盐酸盐 5%三氯化铁乙醇溶液、5% 硅钨酸乙醇溶液、0.1%的2 ,2 -二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液、10%硫酸乙醇溶液、三氯化铝试液、10%磷钼酸乙醇溶液、2%香草醛硫酸乙醇溶液( 浓缩丸)、23-乙酰泽泻醇B对照品、毛蕊花糖苷对照品、熊果酸对照品、绿原酸对照品、枸杞子对照药材、菊花对照药材、落新妇苷对照品、山药对照药材、 一、酒萸肉和牡丹皮的含量测定 （1） 酒萸肉 （酒萸肉又叫山茱萸,本品主要使用为山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉 ，酒萸肉提取物中主要含莫诺苷、马钱苷等成分。） 方法1 照高效液相色谱法（2015年版药典一部附录ⅥD）测定 1色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇—乙腈—0.1%磷酸溶液（5：9：86）为流动相；检测波长为236nm。理论板数按马钱苷峰计算应不低于4000。 2对照品溶液的制备 取马钱苷对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成每1ml含40μg的溶液，即得。 3供试品溶液的制备 取本品适量，研碎，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，加在中性氧化铝柱（100～200目，4g，内径为1cm）上，用40%甲醇50ml洗脱，收集流出液与洗脱液，蒸干，残渣用50%甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 4测定法 分别精密吸取对照品溶液10μl与供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。 本品每1g含酒萸肉以马钱苷（C17H26O10）计，不得少于1.11mg。 方法2 RP -HP L C法对杞菊地黄丸( 浓缩丸) 中马钱苷进行含量测定 1、色谱条件色谱柱: Di a mo n s i l -C 18( 250 mm×4. 6 mm, 5 μm) ; 流动相: 乙腈- 甲醇-0. 1%磷酸溶液( 10∶ 5∶ 85)，（流动相对样品测定影响较大建议尝试四氢呋喃-乙腈-甲醇(1∶ 8∶4)- 0. 05% 磷酸溶液比较）; 流速: 1 mL/mi n ,检测波长: 236 n m, 柱温: 室温（ 柱温仅对保留时间有影响， 对样品分离无影响， 考虑到出峰时间，有的选择柱温为 40 ℃ ，与 2010年版《中国药典》 一部一致。） 理论板数以马钱苷峰计算,不低于 4 000。2 12. 42 mg , 置 50 mL量瓶中, 加甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 作为对照品储备液, 分别吸取对照品储备液 1, 3, 5, 7, 10 ml置 50 ml量瓶中, 加 85%甲醇至刻度, 分别进样 20 μL , 在236nm 测定其峰面积, 以峰面积为纵坐标, 对照品进样量为横坐标, 绘制标准曲线。 Y=1 033 962. 149X+3 383. 116, R=0. 999 6。, 进样量在 0. 090 0 ～ 0. 900 μg, 马钱苷峰面积与进样量有良好线性关系。3重复性试验分别精密称取同一批号样品 6份, 用 6个测定结果进行评价。1. 17 mg /g , R S D为 1. 1%, 表明重复性较好。2.4稳定性试验 考察对照品溶液、。、10 μL , 分别在制备后 0, 2, 4, 8 h按样品测定项下的方法进行峰面积测定。（参考结果： 计算峰面积, RS D分别为0. 7%、0. 6%, 。2.5加样回收率试验精密称取同一批号样品 6 份, 用 6 个测定结果进行评价。 , 按样品测定项下的供试品溶液制备方法进行制备、, 计算回收率。 , 其它七味药按生产工艺制成。, 按样品测定项下方法进行测定 。 2.7样品测定 取本品适量 , 研碎 , 取约 1g , 用 8 5%甲醇 20m L 分 3次(每次 15 m i n ) 超声振荡提取, 滤过,弃去滤液,合并滤渣, 精密称定 , 置具塞锥形瓶中, 精密加入85%甲醇50 mL , 密塞 ,称定重量 ,加热回流 1 h , 放冷, 再称定重量,用85%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过, 取续滤液 , 作为供试品溶液,每次进样 20 μ L 。, 发现在流动相乙腈 - 甲醇 -0. 1%磷酸溶液 (10∶ 5∶ 85) ,马钱苷