大孔吸附树脂预处理HPLC法测定甘肃棘豆中苦马豆素含量.pdf

l 第16卷第l期 分析测试技术与仪器 Volume16Number l ANAI,YSISAND ANDINSTRUMENTS Mar．2010 20 0年03月 TESTINGTECHNOI．OGY 分析测试新成果(6一10) 大孑L吸附树脂预处理一HPLC法测定甘肃 棘豆中苦马豆素含量 段秋燕1，一，黄新异1，李 辰1，倪京满2，邸多隆12 (1．中国科学院兰州化学物理研究所中科院西北特色植物资源化学重点实验室和 甘肃省天然药物重点实验室，甘肃兰州730000；2．兰州大学药学院，甘肃兰州730000) 摘要：应用大孔吸附树脂为样品前处理技术，对甘肃棘豆中干扰苦马豆素含量测定的化合物进行选择性吸附除 杂，以HPLC法测定样品中的苦马豆素含量．方法的平均回收率为92．81％(相对标准偏差为3．67％)，日内和日间 精密度分别为1．40％和3．98％，线性范围为0．022～0．730mg／mL，方法检出限为0．010mg／mL．方法可有效去除 苦马豆素测定的干扰化合物，适用于甘肃棘豆中苦马豆素的含量测定． 关键词：大孔吸附树脂；甘肃棘豆；苦马豆素 中图分类号：0657．35 文献标识码：B 文章编号：1006-3757(2010)Ol-0006-05 Kansuensis 糖苷酶活性抑制分析法中，由于酶活性所受条件较 甘肃棘豆(Oxytropis Bunge)是豆科 棘豆属多年生草本植物，主要分布在祁连山脉的高 多，重现性不理想．文献[5]报道的高效液相色谱法 山草甸草原，是疯草的一种，能够造成牧畜的中毒． 样品需要量大，样品前处理程序繁琐，且流动相pH 据报道，引起家畜疯草中毒的主要毒性成分是苦马 值较高，使色谱柱的使用寿命缩短．由于苦马豆素在 豆素(见图1)．研究发现苦马豆素除具有毒性外，还 甘肃棘豆中的含量极低约23mg／kg【13，且苦马豆素 具有抗肿瘤和免疫刺激作用．因此，以苦马豆素为有 为多羟基的吲哚兹定类生物碱，分子中无双键，仅在 效成分的新药研究，引起了国内外学者的广泛关注， 紫外末端有吸收(200am左右)．通常的HPLC法测 在国外已进入临床研究阶段L1j．目前，苦马豆素的 定甘肃棘豆中苦马豆素的含量，容易受到杂质干扰， 来源主要有合成法、生物法和植物提取法．由于合成 导致结果不准确．利用大孑L吸附树脂进行样品前处 法和生物法技术尚不成熟，因此苦马豆素主要是从 理，达到富集或净化的目的，已越来越多的应用于天 植物中提取分离得到．苦马豆素主要存在于豆科苦 然产物复杂体系的样品前处理¨J．本实验以大孔吸 附树脂对甘肃棘豆中干扰苦马豆素含量测定的成分 马豆属(Swainsonia)、棘豆属(Oxytropis)和黄芪属 (Astragalus)、旋花科番薯属(Ipomoeacarnea)、锦葵进行选择性吸附除杂，用高效液相色谱(HPLC)测 科黄花稔属(Side)植物中口J，其中在甘肃棘豆中含定甘肃棘豆中苦马豆素的含量，操作简单、重现性 量最高．目前，苦马豆素的含量测定方法主要有气相 好，为甘肃棘豆植物资源的开发利用和新药研究提 色谱法(GC)口J、薄层扫描法(TLSC)HJ、高效液相色 供了参考． 谱法(HPLC)IS]、o【一甘露糖苷酶活性抑制分析法(d 1 实验部分 —MIA)∞J．气相色谱法样品需要柱前衍生化，操作 繁琐；薄层扫描法中