GB/T 8622-1988大豆制品中尿素酶活性测定方法.pdf

中华人 民共和 国国家标准 UDC 664.841.655 大豆制品中尿素酶活性测定方法 :543-062 GB 8622一88 Methodforthedeterminationofurease activityinsoyabeanproducts 1 适用范围 本标准适用于由大豆制得的产品和副产品中尿素酶活性的测定。本法可确认大豆制品的湿热处理 程度。 2 定义 本标准所指尿素酶活性定义如下: 在3。士。.5℃和pH7的条件下，每分钟每克大豆制品分解尿素所释放的氨态氮的毫克数 3 原理 将粉碎的大豆制品与中性尿素缓冲溶液混合，在30℃保持30min，尿素酶催化尿素水解产生氨的反 应 用过量盐酸中和所产生的氨，再用氢氧化钠标准溶液回滴。 4 仪器设备 4.1样品筛:孔径200pm; 4.2 酸度计:精度0.02pH,附有磁力搅拌器和滴定装置; 4.3恒温水浴:可控温30士。.5,C; 4.4 试管:直径18mm，长150mm，有磨口塞子; 4.5 精密计时器; 4.6 粉碎机:粉碎时应不生强热(例如球磨机) 4.7分析天平:感量。.lmg; 4.8 移液管:lOmL, 5 试剂和溶液 5.1尿素(GB696-77):分析纯; 5.2 磷酸氢二钠(GB1263-77):分析纯; 5.3 磷酸二氢钾(GB1274-77):分析纯; 5.4 尿素缓冲溶液(pH6.9至7.的:4.45g磷酸氢二钠((5.2)和3.40g磷酸二氢钾((5.3)溶于水并稀释 $1OOOMI，再将30g尿素(5.1)溶在此缓冲溶液中，可保存1个月。 5.5 盐酸(GB622-77):分析纯，c(HCl)=0.lmol/L溶液; 5.6 氢氧化钠(GB629-77):分析纯，c(NaOH)=0.lmol/L标准溶液，按GB601标准溶液制备方法 的规定配制。 中华人民共和国农牧渔业部1987一08一20批准 1988一08一01实施 GB8622一88 6试样的制备 用粉碎机((4.6)将log试样粉碎，使之全部通过样品筛(4.1)对特殊试样(水分或挥发物含量较高 而无法粉碎的产品)应先在实验室温度下进行预干燥，再进行粉碎，当计算结果时应将干燥失重计算在 内。 7 测定步骤 称取约。2g已粉碎的试样，称准至。lmg，转入试管((4.4)中(如活性很高只称0.05g试样)，移入 lOmL尿素缓冲溶液(5.4)，立即盖好试管并剧烈摇动，马上置于30士。.5℃恒温水浴((4.3)中，准确计时 保持30min,即刻移入lOmL盐酸溶液((5.5)，迅速冷却到200C。将试管内容物全部转入烧杯，用5m1.水 冲洗试管两次，立即用氢氧化钠标准溶液(5.3)滴定至pH4.70, 另取试管作空白试验，移入1OmL尿素缓冲液(5.4),1OmL盐酸溶液((5.5)。称取与上述试样量相 当的试样，也称准至0.lmg，迅速加人此试管中。立即盖好试管并剧烈摇动 将试管置于30士。.5℃的恒 温水浴，同样准确保持30min，冷却至20C，将试管内容物全部转入烧杯，用5mL水冲洗试管两次，并用 氢氧化钠标准溶液(5.3)滴定至pH4.70, 8 测定结果的计算 8.1 计算方法 以每分钟每克大豆制品释放氮的毫克量表示的尿素酶活性u，按下式计算 14XC(Va-V) 30xm 式中:。-— 氢氧化钠标准溶液浓度，mol/L; V}— 空白试验消耗氢氧化钠溶液体积，mL; V-一 测定试样消耗氢氧化钠溶液的体积，mL; m— 试样质量+g. 注:若试样经粉碎前的预千燥处理时，则