GB/T 4789.35-2003食品卫生微生物学检验　乳酸菌饮料中乳酸菌检验.pdf

GB/T4789.35-2003 前 言 本标准对GB/T16347-1996((乳酸菌饮料中乳酸菌微生物学检验》进行修订 本标准与GB/T16347-1996相比主要修改如下: — 按照GB/T1.1-200。对标准文本的格式和文字进行修改。 — 修改和规范原标准方法中的“设备和材料”。 本标准自实施之日起，GB/T16347-1996同时废止。 本标准的附录A是规范性附录。 本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。 本标准起草单位:南京市卫生防疫站、广东省食品卫生监督检验所、上海市食品卫生监督检验所、中 国疾病预防控制中心营养与食品安全所 本标准主要起草人:陈晓蔚、刘敏、杨明、朱曼丹、瞿明娟、周蓓君、杨宝兰、李志刚 原标准于1996年首次发布，GB/T4789.35-2003代替GB/T16347-1996, GB/T4789.35-2003 食 品卫生微 生物 学检验 乳酸菌饮料中乳酸菌检验 1 范围 本标准规定了乳酸菌饮料中乳酸菌检验的技术要求。 本标准适用于以鲜乳、乳粉或辅以大豆等为原料，经乳酸菌发酵加工制成的具有相应风味的活性乳 酸菌饮料。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注 日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T4789. 食品卫生微生物学检验方法 总则 GB/T4789. 食品卫生微生物学检验方法 染色法、培养基和试剂 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 乳酸菌 lacticacidbacteria 一群能分解葡萄糖或乳糖产生乳酸，需氧和兼性厌氧，多数无动力，过氧化氢酶阴性，革兰氏阳性的 无芽胞杆菌和球菌。 3.2 乳酸菌菌落总数 lacticacidaerobicbacteria 检样在一定条件下培养后，所得 1mL(g)检样中所含乳酸菌菌落的总数。 4 设备和材料 4.1 冰箱 :0℃一4C。 4,2 恒温培养箱:36℃士ICe 4.3 恒温水浴锅:460C11C 4.4 显微镜:lox一loox。 4.5 均质器或灭菌乳钵。 4.6 架盘药物天平:。g-5009，精确至0.59。 4.7 锥形瓶:500mL, 4.8 广口瓶:500ml-, 4.9 灭菌吸管:1mL(具。.01mL刻度),10mL(具0.1ml刻度)。 4.10 灭菌平皿:直径90mm, 4.11 灭菌刀、剪、镊子。 5 培养基和试荆 5.1 改良TJA培养基(改良番茄汁琼脂培养基) GB/T4789.35-2003 5.2 改良MC培养基(ModifiedChalmers培养基)。 5.3 0.1%美蓝牛乳培养基 5.4 6.5%氯化钠肉汤。 5.5 pH9.6葡萄糖肉汤。 5.6 40%胆汁肉汤。 5.7 淀粉水解培养基:见第A.7章。 5.8 精氨酸水解培养基:见第A.8章。 5.9 七叶昔培养基:见第A.10章。 5.10 革兰氏染色液:按GB/T4789.28规定。 5.11 3%过氧化氢溶液:按GB/T4789.28规定。 5.12 蛋白陈水、靛基质试剂:按GB/T4789.28规定。 5.13 明胶培养基:按GB/T4789.28规定 5.14 硝酸盐培养基、硝酸盐试剂:按GB/T4789.28规定。 5.15 0.85%灭菌生理盐水。 6 乳酸菌菌落总数的测定 6.1 检验程序 孚L酸菌菌落总数检验程序见图 6.2 操作步骤 6.2.1 以无菌操作将经过充分摇匀的检样25ml.(g)放人含有225m工灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内 作成 1，10的均匀稀释液。 6.2.2 用1mL灭菌吸管吸取1，10稀释液ImL，沿管壁徐徐注入含有灭菌生理盐水的试管内(注意吸 管尖端不要触及管内稀释液)，振摇试管，混合均匀。 6.2.3 另取 1mL灭菌吸管，按上述操作顺序，作10倍递增稀释液，如此每递增一次，