乙酸胁迫酵母细胞凋亡过程中单个线粒体损伤的拉曼光谱分析.pdf

第43卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第5期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2015年5月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 643~650 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.141040 乙酸胁迫酵母细胞凋亡过程中单个线粒体损伤的拉曼光谱分析 1,2 2 1,2 1 3 *2 李 冰 摇 卢明倩摇 王巧贞 摇 石贵玉摇 廖 威摇 黄庶识 1 2 (广西师范大学生命科学学院,桂林 541004)摇 摇 (广西科学院生物物理实验室,南宁530007) 3(广西职业技术学院,南宁530226) 摘摇 要摇 应用激光光镊拉曼光谱技术(LTRS)作为一种非入侵分析线粒体的工具,结合氧电极法、紫外分光光 度计法,研究乙酸胁迫酵母细胞后提取的线粒体,以及直接胁迫正常酵母细胞的离体线粒体的拉曼光谱。 结 -1 果显示,乙酸胁迫酵母细胞后提取的线粒体的拉曼光谱,归属于核酸的谱峰(1081和1301 cm )、蛋白质的谱 -1 -1 峰(872,1445,1604 和 1657 cm )、脂类的谱峰(1125,1301,1445 和 1657 cm )、Cyt c 的特征峰(750 和 -1 -1 1125 cm )、线粒体呼吸特征峰(1604 cm ),都随着诱导程度的加深而降低,与常规法测定的指标呼吸率,磷 氧比,细胞色素C含量的降低,MDA含量的升高的变化趋势相似;乙酸直接胁迫线粒体的拉曼光谱,归属于核 -1 -1 酸的谱峰(1081和1301cm ),蛋白质的谱峰(872,1445,1604 和1657 cm ),脂类的谱峰(1125,1301,1445和 -1 -1 -1 1657 cm ),Cyt c 的特征峰(750 和1125 cm ),线粒体呼吸特征峰(1604 cm ),都随着诱导程度的加深而降 低,与常规法测定的指标呼吸率、磷氧比、细胞色素C含量的降低,MDA含量的升高的变化趋势相似。 结果表 明,乙酸胁迫细胞过程中,乙酸进到细胞内可能直接作用于线粒体,引起线粒体内物质的释放,导致依赖于线 粒体途径的细胞凋亡。 关键词摇 拉曼光谱;乙酸胁迫;酵母细胞;线粒体;凋亡 1摇 引摇 言 乙酸是酵母发酵过程中的一种代谢产物,它不能被酵母代谢,会对酵母细胞产生生理毒害作用,抑 [1,2] 制酵母发酵,如果乙酸等代谢产物进一步积累就会诱发酵母细胞大量死亡 。 用20 ~200 mmol/ L 乙 酸对对数期的酿酒酵母细胞进行胁迫,酵母细胞会发生