化学键合相薄层色谱.pdfVIP

综 述 化 学 键 合 相 薄层 色 谱 张震南 （云南省化工研究所，昆明） 反相薄层色谱(RPTLC)中使用两类固定相： （1）物理结合的，2）化学键合的。前者的制备常 用石蜡油等非极性液体涂在硅胶等载体上，此固定 相的缺点是稳定性和重现性较差。化学键合固定相 具有许多优点：斑点扩散小；Rf值重现性好；点样 量较大；能广泛用于多种样品的分离，特别适于极 性强的复杂样品（氨基酸、维生素等）。化学键合 固定相的出现使RPTLC近几年得到迅速发展。本 文综述化学键合相TLC的最新进展。 （一）化学键合相薄层色谱板 经典薄层色谱 TLC）主要是以硅胶为固定相 的吸咐TLC。近几年发表的TLC论文中，很多涉及 用非极性的化学键合相硅胶作固定相。Gilpin[1]和 Kaiser[2]十年前用不同碳链(Cn,n=1,2,6,8, 12,18)的烷基氯化硅烷与硅胶（载体）进行化学键 有两种方法制备富 学键合相薄层板：（1）把粘 合反应，结果生成化学键合相硅胶。例如二甲基辛基 合剂与硅烷化硅胶混匀，再加入非极性溶剂调匀， 氯硅烷与硅胶反应得到辛基硅胶，见图1。非极性 制板，凉干后使用；（2）原位反应硅烷化。国际市 烷基通过Si-O-Si键联结，使这种固定相材料成 场上已有多种化学键合相薄层板供应，见表1。 为疏水的，广泛用于RPTLC。 Whatman公司供应的Multi-K，CS5型薄层板 表 1 商品化学键合相薄层板 由3cm宽C18键合相薄层和硅胶薄层联结在一块板 上，见图2。使用时先把样品点在Cl8键合相薄层板 上，按照RPTLC条件展开，然后转90 按照吸 附TLC条件在硅胶薄层上进一步展开。此板结合 RPTLC和吸附TLC的优点，能把样品中极性和 非极性组分在同一块薄层板上实现分离。这种兼有 极性和非极性样品用其他薄层板往往不能满意地分 离。 化学键合相硅胶的烷基化程度也为分离提供选 择性。化合物在完全烷基化薄层上接近溶剂（流动 相）前沿，有利于分离极性物质。为了实现最佳分 离，应根据样品性质选择适当的固定相材料。 （三）化学键合固定相薄层色谱的展开 1.流动相效应[6,7]用得最多的流动相是 水和甲醇的混合溶剂，居第二位的溶剂是乙腈和 市场上虽然也能得到极性较强键合相（例如含 水的混合物；偶尔使用的溶剂有丙酮、二恶烷、四 苯基、氰基、氨基或二羟基）薄层板，但实际上较 氢呋喃。 少使用。 溶剂中水的含量和有机溶剂的性质决定分离 （二）化学键合相薄层板的性能 的选择性和RM值。改变溶剂中水含量是一种简易 化学键合相薄层板具有许多优良性能，因此扩 的调整RM值的方法。对许多物质（醇、酚、酯和 大了RPTLC的应用。其主要特性如下： 更复杂的化合物咖啡因等），RM值和溶剂组成呈 1.重复使用。用过的键合相薄层板只要经过 线性关系；水含量增加，RM值跟随着增大。对极 洗涤和干燥后就可以重新使用[3-5]。例如What- 性很大的物质，水含量增加，RM值增大的速度慢 man生产的KC18反相薄层板层析后，只要用MeOH 些。使用三种溶剂，分别改变其中水的含量，化合 或CH2Cl2洗去层析物（在UV光下不被检出）就可