表达乙肝病毒preS2S蛋白的荷瘤小鼠模型的建立.pdfVIP

WEST CHINAMEDICAIJOURNAL2008，Vo1．23，No．1 CN51—1356／R [文章编号]1002—0179 (2008)O1—0096—03 表达乙肝病毒preS2S蛋 白的荷瘤小鼠模型的建立 EstablishmentofA MouseModelofLoadingHBV PreS2SAntigenExpressionSP2／0MyelomaCells 何芳，唐红，刘丽，刘聪，赵连三 HEFang，TANG Hong，LIU Li，eta1． (四川大学华西医院感染性疾病中心，生物治疗-R[家重点实验室感染性疾病研究室，~ItJJl成都 610041) (Centeroflnj~ctioasDiseases，State研 ofBintherapy，WestChinaHospital，SichuanUniversity，Chengdu610041，China) 摘要：目的：建立能表达乙肝病毒 (hepatitisBvirus，HBV)preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，为研究 HBV核 酸疫苗的体内CTL应答及免疫治疗作用提供简便易行的研究模型。方法 ：以免疫印迹法验证SP2／0一$2S细胞中有 HBVpreS2S抗原的稳定表达 ，将 SP2／O一$2S细胞种植到 BALB／c小鼠胁部皮下 (荷瘤)，观察能否生长成瘤，以 及成瘤的时间、肿瘤大小和荷瘤后小鼠的生存时间；以免疫组织化学法检测小鼠肿瘤组织 HBVpreS2S抗原的表 达。以不表达pres2s抗原蛋白的SP2／0一CMV细胞荷瘤小 鼠作为阴性对照。结果 ：荷瘤后 3天～1周 ，SP2／0一 $2S细胞可在小鼠皮下形成实体肿瘤 ，成瘤率为 100％，肿瘤细胞中有 preS2S抗原表达 ，荷瘤后小 鼠的平均生存 时间为 16±1天；与不表达PreS2S抗原蛋白的SP2／0一CMV细胞荷瘤小鼠相比，成瘤率、成瘤时间、肿瘤大小及 生存时间差异。结论 ：建立了能表达HBVpreS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用于HBV核酸疫苗的体内CTI应 答及免疫治疗作用的实验研究。同时也建立 了不表达preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用作阴性对照。 关键词：乙型肝炎病毒 ；preS2S抗原；BALB／e小鼠；SP2／0细胞 [中图分类号]R5t2．62 [文献标志码]A Abstract：Objective：ToestablishamousemodelofloadingHBVpreS2SantigenexpressionSP2／0myelomacells，soasto providethemethodolo~calbasesforstudiesondetecting出especificCTLrespondsandimmunot}lempyeffectsofHBVDNAvac— eines vivo．Methods：TheexpressionofHBV preS2Santigenof theSP2／(】一s2ScellswasdetectedbyWesternBIotassay． BALB／cnlieeweresubcutaneouslyifloeulatedwi山theHBVpreS2Snatigenexpressions2Scells．111etimeofvisibletPanorforma— tion．andthesizeoftumorwasob~rved．Thel spanandsurvivalrateofmiceafterloadedwiththetumorcellswerenaalyzedby l棚g—Rankstatistics．TheexpressionofHBVpre$2Snatigenofhtetumorswasdetectedbyimmunohistochemicatassays．BAIB／ cmicesubcutaneouslyinoculatedwithSP2／0一CMVcellsnotexpressingtheHBVpreS2Snatigen．wereusedasthenegativ