骨髓间充质干细胞诱导为血管内皮样细胞的实验研究.pdfVIP

北京医学2008年第30卷第 l2期 ． 论著 ． 骨髓问充质干细胞诱导为血管内皮样 细胞的实验研究 杜振宗 1 任华2 张超纪2 宋剑非1 郑民1 林峰 1 摘【要】 目的 探讨犬骨髓问充质干细胞(BMMSCs)向血管内皮样细胞分化的机制。方法 骨髓穿刺获取犬骨 髓 ，提取单个核细胞 ，取第2～4代细胞用含VEGF的培养液诱导，对细胞进行形态学观察和相关抗原的免疫荧光鉴 定。结果 BMMSCs在含 VEGF的培养液 中诱导，2周后外观呈现鹅卵石样 ，免疫表型显示 vWF阳性表达 ，透射电镜 可见细胞具有血管内皮细胞 的特点。结论 骨髓 间充质干细胞可在体外分化为具有血管 内皮细胞特性的细胞 。 【关键词】 骨髓间充质干细胞 血管内皮样细胞 诱导 分化 免疫荧光 ExperimentalresearchofcanineBMMSCsinducedtovascularendothelium-likecells DUZhen-zong，RENHua,ZHANGChao-jtetal (DepartmentofCardiothoraeic，AffiliatedHospitalof-(；．ilinMedicalCollege，Guilin541001) A【bstract】 Objective ToinvestigatetheinductionofBMMSCsintovascularendothelium—likecells(VELCs)in vitro．M ethods Thecaninebonemarrow wasaspiratedfrom sternum．BMMSCswereisolated andpurifiedbydensity gradientcentrifugationandadheriontothecultureplastic．VELCsderivedfrom BMMSCswerecultured inDMEM—LG with VEGF and observedbymorphology and immunofluorescence．Resnits VELCswere cultured and sub—cultured successfully．VELCsshowedcobblestone-likemorphologyandsufficientcellorgans．Immunofluorescenceresultsshowed vWF ofVELCswaspositive．Conclusions BMMSCscan beinduced intoVELCswith thecharacteristicofvascular endothelia1cells． 【Keywords】 Bonemarrowmesenchymalstem cells (BMMscs) Vascularendothelium-likecells(VELCs) Induce／induci【on Differentiate／differentiation Immunofluorescence 胚胎学研究表明．造血系统祖细胞与血管内皮 HyClone公司)，血管 内皮细胞生长因子 fVEGF)(美 细胞祖细胞来源相同．它们具有多种相同抗原表达 ， 国．Sigma公司1，兔抗人八因子相关抗原(vWV)多克 如 CD34、Flk—l、Tie一2等Ⅲ。研究表 明．血液系统中 隆抗体 f武汉博士德生物工程有限公司1，异氢酸荧 存在血管内皮细胞的前提细胞E2，31我们于2006年5 光素标记羊抗兔 IgG (FITC—IgG)f武汉博士德生物工 月至 2008年 2月采用体外细胞培养的方法 ．分离骨 程有限公司1 髓问充质干细胞 ，并 向血管内皮样细胞诱导 、分化