花生种子脂肪氧化酶的活性测定研究.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgd．Sei，2008，36(32)：14033—14035 责任编辑 张彩丽 责任校对 李洪 花生种子脂肪氧化酶的活性测定研究 侯美玲 ，苗华荣 ，陈静 ，王绍斌 (1．沈阳农业大学农学院，辽宁沈阳110161；2．山东省花生研究所，山东青岛266100) 摘要 [目的]为了研究花生种子脂肪氧化酶的适宜测定条件。[方法]采用紫外分光光度法测定花生种子脂肪氧化酶的活性。[结 果]结果表明：花生种子脂肪氧化酶最适反应体系为浓度O．10nml／LpH值5．8的磷酸缓冲液和浓度0．20moI／LpH值8．0的磷酸缓冲 液；最适反应温度为35℃；最适酶液添加量为30 ；最适测定时间为 1min。此外，酶液保存在4℃条件下，脂肪氧化酶的活性随时间的 延长而逐渐下降。l结论]该研究为进一步探讨花生种子脂肪氧化酶的生理功能奠定了基础。 关键词 花生：脂肪氧化酶 ；酶活 中图分类号 $565．2 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(20o8)32—14033—03 MeasurementofPeanutSeedsLipoxygenaseActivity HOUMei-lingetal (ShenyangAgriculturalUniversity，Shenyang，Liaoning110161) Abstract [Objective]Theresearchaimedtostudythesuitablemeasurementconditionforpeanutlipoxygenaseactivities．[Method]Spectro— photometricassaywasusedtomeasuretheactivityofpeanutlipoxygenase．[Result]Theresultsshowedthattheoptimalreactionsystemswere concentration0．10mo1／LpH value5．8andconcentration0．20no1／LpH value8．0phosphatebuffersolution．theoptimaltemperaturewas 35 ℃ ，theoptimaladdedcontentofpeanutlipoxygenasesolutionwas30 l，theoptimalmeasuretimewas1minute．Moreover，whenitwas consmwedat4℃，theactivityofpeanutlipoxygenasewasfallenwithtime．5Conclusion]Thisstudylayedagoodfoundationofrresearchon thephysiologicalfunctionofpeanutlipoxygenaseactivity． Keywords Peanut；Lipoxygenase；Activity 脂肪氧化酶一直被认为是脂质降解 中最关键的酶类之 2 结果与分析 一 。 目前 ，对于脂肪氧化酶活性 的检测方法主要有显色 2．1 磷酸缓冲液浓度对花生种子脂肪氧化酶活力的影响 法 、紫外分光光度法 、氧电极法 、单克隆抗体检测法 j 以浓度0．05、0．10和0．20mol／L，pH值5．8、8．0的磷酸缓冲 和量压法 ，其中紫外分光光度法应用最为普遍。相对于研 液作为反应体系测定花生种子脂肪氧化酶酶活，结果如表 1 究较多的大豆和水稻，花生种子脂肪氧化酶的活性测定鲜有 所示。由表 1可见 ，pH值为5．8时，浓度0．10mol／L磷酸缓 报导。试验采用紫外分光光度法对花生种子脂肪氧化酶进 冲液中的酶活力最大；pH值为8．0时，浓度0．20mol／L磷酸 行测定，初步确定 了适宜花生种子脂肪氧化酶的反应条件 ， 缓冲液中的酶活达到最大值。 并且研究了酶提取液在保存过程中的活性变化，为进一步探 表1 不同浓度与不同pH值磷酸缓冲液中花生脂肪氧化酶活力 讨花生种子脂肪氧化酶的生理功能奠定基础。