利用免疫亲和色谱柱特异性敲除甘草酸的方法学研究.pdf

·OUPU · 中草药 =q==e=a 第QT卷 第NS期 OMNS年U 月 利用免疫亲和色谱柱特异性敲除甘草酸的方法学研究 N P P N N N P OG 曾文浩 ，孔 慧 ，屈保平 ，张美龄 ，王咏枝 ，闫 昕 ，赵 琰 ，屈会化 NK 北京中医药大学中药学院，北京 NMMMOV OK 北京中医药大学 科研实验中心，北京 NMMMOV PK 北京中医药大学基础医学院，北京 NMMMOV 摘 要：目的 制备特异性敲除甘草酸的免疫亲和色谱柱。方法 抗甘草酸单克隆抗体与k_ 活化的pé~=Q_qj 凝胶 偶联制备甘草酸特异性敲除免疫亲和色谱柱，利用 emi 法测定敲除液与洗脱液中甘草酸质量浓度，考察甘草酸免疫亲和 色谱柱的最大载样量、敲出率、精密度、准确度及稳定性等参数。结果 甘草酸免疫亲和色谱柱的最大载样量为NKPOS NN； 日内及日间精密度总opa 分别为MKSRB，相对误差（ob）为MKPTB；免疫亲和色谱柱稳定性实验显示PO= 内甘草酸敲除率 的opa 为NKPTB，稳定性良好。结论 制备的甘草酸特异性敲除免疫亲和色谱柱能快速、高效、稳定地敲除甘草酸。 关键词：甘草酸；单克隆抗体；免疫亲和色谱柱；敲除；emi 中图分类号：oOUQKO 文献标志码： 文章编号：MORP JOSTMEOMNSFNS JOUPU JMR alfW NMKTRMNLKKMORPJOSTMKOMNSKNSKMNM j ===== = N P P N N N P wbkd=tJ~ I=hlkd=e I=nr=_~Jé I=wekd=jJä I=tkd=vJ I=vk=u I=wel=v~ I O nr=eJ~ NK=pä==j~í~j~I=_=rí===jI=_=NMMMOVI=~ OK=í==pí=o~I=_=rí===jI=_=NMMMOVI=~ PK=pä==mä~ä=jI=_=rí===jI=_=NMMMOVI=~ Wl q=éé~=í=ä=~=EdF=~í=~í~é=äI==ä=é~ää í=í=dKj ~í=~í~é=EfF=ä=~=äé==~äíä=éä=í=~íJdJj=í k_J~í~í=pé~qj Q_K=q=í~í==d=~=íí==emiI=~=í=~=éä=~é~íI=í~äíI éI ~=~~==í=f=ä==d==íK o q=~=~é~í==í=f=ä==d=~ NKPOS NNI=íé=EopaF==d=~=MKSRBI~=í=~~=EobF=~=MKPTBK=opa==d=í~=NKPTB==PO=I= ~=éíí=ää=í~äíK dJf=ä=ä=~éäI=íäI~ í~ä=í=í=dK hW ä=~X=ä~ä=~íX=~í=~í~é=äX=JíX=emi 中药活性成分是中药发挥疗效的基础，中药活 xQJSz 础的新思路与方法 。 性成分的研究不仅是中药质量控制的基础，更是中 免疫亲和色谱特异性敲除技术原理类似于“基 医药现代化的关键环节。目前，中药活性成分的研 xTz 因敲除”技术 ，可通过对比药物中某一特定成分 究主要采用的是“还原论”xNz xOz “靶向技术”或“血 敲除前后的功效变化，从而阐释该成分与整体药效 xPz 清药理学” 等技术，但上述技术在揭示中药活性 的相关性，可用于解析药物的活性成分与该药物功 成分对中药材或复方的关联度及贡献度等方面还存 效的关联度、贡献度大小及活性成分与其他成分之 在不足。因此，本课题组提出基于小分子单克隆抗 间相互作用关系等问题。利用中药活性成分的单克 体的免疫亲和色谱特异性敲除技术研究中药物质基 隆抗体制备免疫亲和色谱柱，可以特异性地从药材 收稿日期：OMNSJMPJPM 基金项目：国家自然科学基金资助项目（UNQ