水凝胶化成人甲状旁腺细胞形态和功能的.pdf

目呸丛盟堂盘查!鱼!!生!旦箜塑鲞箜!塑 !!堕!尘!!!!』!!婴尘堕!!!g!翌!!!型!翌!Q!!：!丛箜：№：!·85· 水凝胶化成人甲状旁腺细胞形态和功能的 观察 赵越 罗斌+ 【摘要】 目的探索水凝胶为载体包裹甲状旁腺细胞的可行性。方法 复苏冻存的成人甲状旁腺细 胞并培养，待细胞足量后，消化、离心、吹打得单细胞悬液，将壳聚糖溶液、交联剂、细胞悬液按比例混合制得 水凝胶，加培养液后于37℃恒温箱中培养，隔日留取培养液上清检测甲状旁腺激素含量，并对凝胶内细胞染 色观察细胞状态。结果 成功复苏并培养成人甲状旁腺细胞，细胞贴壁生长呈梭形；水凝胶成胶时间< 1 min；荧光扫描结果显示24h后胶内活细胞比例>90％，连续观察3d，比例没有发生明显改变；培养液中 均检测到甲状旁腺激素。结论水凝胶化的成人甲状旁腺细胞操作简单，甲状旁腺细胞被水凝胶包裹后， 不仅能够维持细胞的正常形态，且能够稳定释放甲状旁腺激素，有成为细胞载体并应用于移植治疗甲状旁 腺功能减退症的可能。 【关键词】 水凝胶；甲状旁腺功能减退症；甲状旁腺激素；可行性研究 基金项目：北京市卫生系统高层次卫生技术人才项目(2013—2—032) Observationof andfunctionofhuman cells morphology parathyroid Zhao encapsulatedbyhydrogelYue，LuoBin+．D叩。rf。眦矿＆。。。f5。秽r，|，池。。。舶神。z， Medical Capital Universit)，Beijing100053，China author：Luo General Correspotuting Bin，Departmentof Surgery，BeijingTsinghuaChanggungHospital，Beijing102218，China， Entail：luobin@mail．tsingh№．edu．cn To the ofthe asacellcarrierfor cells．Methods 【Abstract】Objectiveexplorefeasibilityhydrogel parathyroid cellswererecoveredandcultureduntil thecellswere Cryopreservedparathyroid sufficient，then digested、centri— and to chitosan andcell were fugedpipettedsingle—cellsuspension．Thesolution，crosslinkingagents suspension mixedto someratio．After covered mediumwereincubatedat37℃in hydrogelsby that，hydrogelsbycomplete constant were for incubator．Meanwhile．thecollected the胛Hlevel other temperature supernatant measuring every andthe and ofcellsin wasalsoevaluated cells day viabilityshape hydrogels byfluorescopy．ResultsParathyroid wererecoveredandcultured andtheadherentcellswere be