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木瓜蛋白酶的化学修饰及对其酶活力的影响chemical modification of
2009 年第67 卷 化 学 学 报 Vol. 67, 2009
第20 期, 2390～2394 ACTA CHIMICA SINICA No. 20, 2390～2394
·研究论文·
木瓜蛋白酶的化学修饰及对其酶活力的影响
薛 勇 李树白 张海涛 聂华丽* 朱利民*
(东华大学化学化工与生物工程学院 上海 201620)
摘要 用不同酸酐对木瓜蛋白酶进行化学修饰, 以三硝基苯磺酸法(TNBS)测定修饰酶的平均氨基修饰度, 对修饰前后
的木瓜蛋白酶分别纯化并通过UV-vis 和IR 对其结构进行了表征. 考察了温度、pH 值和表面活性剂 SDS 对化学修饰
的木瓜蛋白酶活力的影响, 并与天然木瓜蛋白酶进行了比较, 对天然酶和修饰酶进行了动力学研究. 结果表明, 化学
修饰木瓜蛋白酶的最适反应温度为80 ℃; 最适pH 值为9.0; 在SDS 浓度为5 mg•mL－1 时修饰酶酶活仍能保持在50%
2
左右; 在所有酶中, 均苯四甲酸酐修饰木瓜蛋白酶的催化效率最高, 为 2.442 ×10 . 与天然木瓜蛋白酶相比, 化学修饰
木瓜蛋白酶的热稳定性、耐碱性和耐洗涤性得到了显著提高.
关键词 化学修饰; 木瓜蛋白酶; 酸酐; 动力学
Chemical Modification of Papain and Effect on Its Enzyme Activity
Xue, Yong Li, Shubai Zhang, Haitao Nie, Huali* Zhu, Limin*
(College of Chemistry, Chemical Engineering and Biotechnology, Donghua University , Shanghai 201620)
Abstract Papain was modified using different anhydrides. The average ratio of modified-NH was tested
2
by a trinitrobenzenesulfonic acid (TNBS) method. The native and modified papain samples were purified by
dialysis and their structures were characterized by UV and IR. The factors related with the activity of the
modified papain, such as temperature, pH value, kinetic constant and the concentration of SDS were studied
and compared with those of the native papain. The results showed that the optimum reaction temperature and
pH for modifying papain were 80 ℃
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