大鼠心肌蛋白双向凝胶电泳技术的建立 - 大连医科大学学报.pdf

大连医科大学学报 Vol.30 No.5 第 30 卷第5 期 Oct. 2008 2008 年 10 月 Journal of Dalian Medical University 大鼠心肌蛋白双向凝胶电泳技术的建立 许玲姜涛2 张翠丽2 减师竹2 辛毅2 (1.大连医科大学 2∞4 级生物技术专业，辽宁大连 116倒4; 2. 大连医科大学生物技术专业，辽宁大连 116倒4) 摘要: [目的]建立大鼠心肌蛋白质纽研究的双向凝胶电泳(two - dimensional gel electrophoresis ,2 - DE) 技术。[方 法]提取SD 大鼠心月JL 总蛋白，以载体两性电解质 pH 梯度等电聚焦为第一向电泳，垂直 SDS -聚丙烯昌先滕凝胶电 泳为第二向电泳，完成 2 -DE，考马斯亮蓝染色后扫描获取凝胶图像并用 PDQuest 软件进行分析。对2 - DE 中关 键环节，如调节 pH 3 -10 和 pH 4-6 载体两性电解质的比例、样品离心处理、增加等电聚焦电压和离子强度等方 面进行优化。[结果]通过样品处理后离心除去多糖成分，pH 3 -10 和 pH 4-6 载体两性电解质的比例调至 1: 2 , 改变电泳条件，成功消除横向拖尾、分辨率较高的心肌蛋白双向电泳图谱。每张图谱可检测到超过 150 个蛋白质 点，匹配率大于 559奋。[结论]建立了 SD 大鼠心月JL蛋白的双向凝胶电泳分析技术，该方法可行、重复性好，所提供 的方案具有一定参考意义。 关键词:心肌蛋白;载体两性电解质;双向凝胶电泳 中图分类号:Q -3 文献标志码:A 文章编号:1671 -7295(2∞8 ) 05 - 0483 - 04 Establishment of a two - dimensional electrophoresis technology on proteins of cardiac muscle XU ling 1 ,JIANG Tao2 , ZHANG Cui 一 li2 , ZANG Shi - zhu2 , XIN Yi2 (1. Undergraduαte in Biotechnology Department of Dalian Medical University , Dalian 116044 , Chinα; 2. Depαrtment of Biotechnology , Dalian Medical University , Dalian 116044 , Chinα) Abstract: [Objective ] Establishes the technology of two - dimensional gel eleetrophoresis on rat cardiac muscle protein group studies (2 - DE). [Methods ] The total proteins of cardiac muscle tissues were separated by carrierampholytes pH gradients based gel electrophoresis for first and the vertical SDS - polyacrylamide gel electrophoresi