实验7 微区紫外-可见分光光度计的设计与应用一、 实验目的二、实验原理.pdf

实验7 微区紫外-可见分光光度计的设计与应用 利用物质分子或者离子对某一波长范围的吸收作用，对物质进行 定性分析、定量分析、以及结构分析，所依据的光谱是分子或者离子 吸收入射光中特定波长的光而产生的吸收光谱。按照所吸收的波长区 域不同可以分为紫外分光光度法和可见分光光度法，合称为紫外－可 见分光光度法。物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长 的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。通过实验掌握 紫外－可见吸收光谱分析所依据的物理原理，初步掌握微区紫外-可 见分光光度计的设计方法，并利用实验室设 搭建测量光路。初步掌 握利用吸收谱分析染料的能级结构和光学参数的方法。 一、 实验目的 1. 掌握紫外－可见吸收光谱分析所依据的物理原理 2. 初步掌握微区紫外-可见分光光度法测量物质吸收谱的光路设计 方法，并利用实验室设 搭建测量光路。 3. 初步掌握利用吸收谱分析染料的能级结构和光学参数的方法。 二、实验原理 光谱分析可以分为发射光谱分析和吸收光谱分析两大类。当构成 物质的分子或原子受到激发而发光，产生的光谱称为发射光谱，发射 光谱的谱线与组成物质的元素及其外围电子的结构有关。吸收光谱是 指光通过物质被吸收后的光谱，吸收光谱则决定于物质的化学结构， 53 与分子中的双键有关。物质对光的吸收，与其分子结构有密切关系， 因而不同物质因结构的差异，产生不同的吸收光谱， 即吸收曲线。 （ ）分子吸收谱的产生 分子吸收谱的形成机理是由于能级之间的跃迁所引起的，在分子 中除了电子相对于原子核的运动外，还有原子核的相对振动和分子作 为整体绕其质心的转动。分子的这三种运动状态都对应 定能级，它 们之间的关系为：Eelec Evib Erot 处在同一电子能级的分子，可能由于振动能量的不同，处在不 同的振动能级上。分子处在同一电子能级和振动能级时，可能由于转 动能级的不同而处在不同的转动能级上。所以分子的总能量是三种能 量的总和 Emol Eelec Evib Erot （1） 当用频率为v 的光照射分子，而该分子的较高能级与较低能级之 差E 恰好等于hv 时，此时在微观上出现分子由较低能级跃迁到较高 能级，在宏观上体现为光的强度变弱。若用 连续频率的光照射分子， 将照射前后光强度的变化变为电 号记录下来，就可以得到 张光强 度变化对波长的关系曲线。即分子吸收光谱图。 图1 是双原子分子的能级示意图。从图中可看出，在同一电 子能级中有几个振动能级，而在同一振动能级中又有几个转动能级。 电子能级间的能量差 般为l～20 电子伏特(eV)。因此，由电子能级 54 跃迁而产生的吸收光谱，位于紫外及可见光部分。这种由价电子跃迁 而产生的分子光谱称为电子光谱。 图1 双原子分子中电子振动和转动能级示意图 A 和 B 为电子能级； V (0,1,2,3, 4) 和V (0, 1, 2,3, 4) 为振动能级； J (0,1, 2,3, 4) 和J (0,1, 2,3, 4) 为转动能级； 在电子能级变化时，不可避免地伴随着分子振动和转动的能级的 变化。因此，分子的电子光谱通常比原子的线状光谱复杂得多，呈带 状光谱。由分子振动能级(能级间的能量差约0.05～1eV)和转动能级 (能级间的能量差小于 0.05eV)的跃迁而产生的吸收光谱，成为振动 —转动光谱或红外吸收光谱。各种物质的分子对红外光的选择吸收与 其分子结构密切相关，故红外吸收光谱法可应用于分子结构的研究。 55 （二）光谱吸收曲线 测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以波长为横坐标， 吸光度为纵坐标作图，得到 条吸收光谱曲线或光吸收曲线，它能清 楚地描述物质对光的吸收情况。光吸收程度最大处的波长叫做最大吸 收波长，用 λmax 表示。吸收峰所处的波长位置，是由于产生谱带的 跃迁能级间的能量差决定的。反映的是分子内能级的分 状况。 （三）光吸收定律 光分为几种：单色光：单一波长的光。复色光：由不同波长组成 的光。互补光：按适当的