sio2对人肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞nf-kb的 - 第三军医大学学报.docVIP

SiO2对人肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞的研究 赵静1 赵杰1 朱海燕1 王献华1 1. 河北联合大学 河北唐山 063000 【摘要】 目的 通过SiO2对肺泡巨噬细胞（AM）和肺成纤维细胞（FB）SiO2刺激（处理组）的AM中NF-κB表达明显增高，在体外培养18小时达高峰，与时间点对照组相比差异具有显著性（P0.05）。经SiO2刺激的硅肺患者AM培养上清作用于FB48小时后，FB中NF-κB表达明显增高，与对照组相比差异具有显著性（P0.05）结论 SiO2可促进AM、FB的NF-κB上调，提示NF-κB在硅肺纤维化的形成与发展中其重要作用，推测NF-κB的表达与硅肺纤维化形成有关。 关键词：SiO2，硅肺，AM，FB, NF-κB The proliferation of NF-κB in alveolar macrophage and fibroblast activated by the silicotic in vitro Zhaojing,Zhaojie, Zhu Hai-yan,Wang Xian-hua Hebei United University , Tangshan , 063000 [Abstract] Objective To study the expression of NF-κB in alveolar macrophage and fibroblast activated by the silicotic .what’s more ,we investigated the effect of NF-κB in human embryonic lung fibroblasts proliferation.. Method The expression of NF-κB was evaluated to AM and lung fibroblasts with immunological cell’s chemical method.Result The expression of NF-κB in the AM of patients with silicosis increased clearly, the expression is increased in different time,the supernatants of AM trained for 18h has the most strong effect. The expression of NF-κB in the FB with silicosis increased clearly.Conclusion AM of patient with silicosis can induce the expression high of NF-κB in AM and FB, the expression of NF-κB in human embric lung fibroblast is increaseded. Key words: SiO2 , silicosis, AM，FB,NF-κB 硅肺是由于长期吸入游离的SiO2粉尘微粒所引起的以肺部硅结节形成及弥漫性肺间质 纤维化为基本病变的职业肺病[1]。AM是肺纤维化过程中的最重要效应细胞，具有很强的生物 学活性，能分泌多种细胞因子[2]。这些因子可能通过信号转导激活与细胞增殖相关的基因，促进肺成纤维细胞（fibroblast，FB）等基质生成细胞的增殖，使ECM的合成和降解失衡，最终导致肺间质纤维化的发生[3,4]。核因子－κB（nuclear factor-kappa B,NF-κB）是一种多功能的转录因子，是一种具有转录激活功能的蛋白质，它能与多种基因启动子或增强子部位κB位点发生特异性结合并促进其转录。NF－κB通过调控多种细胞因子、粘附分子、趋化因子、炎症介质、蛋白质酶等基因的转录调控，介导了肺泡炎和肺纤维化。本实验主要探讨硅肺纤维化过程中NF－κB的作用[5]。 1材料与方法 1.1 实验材料 SiO2粉尘 购自中国预防科学院劳卫所，游离SiO2占97%以上，95%以上的颗粒直径小于5μm。180℃干烤6小时，用无血清培养液DMEM配成浓度为50μg/ml粉尘悬液，4℃储存备用。鼠抗人NF-κB单克隆抗体、SABC免疫组化试剂盒购自武汉博士德生物有限公司。 1.2硅肺患者支气管肺泡灌洗液中AM的收集 硅肺患者支气管肺泡灌洗液由中国煤炭工人北戴河疗养院尘肺康复中心友好提供。患者张某，男，47岁，接尘13年，临床诊断为Ⅱ期硅肺（根据GBZ70-2002尘肺病诊断标准）。患者在全麻下进行双肺灌洗，灌洗