浅谈分子印迹整体柱富集￣高效液相色谱法测定植物中的痕量细胞.PDF

２０１３年４ 月 Ｖｏｌ.３１Ｎｏ.４ Ａｐｒｉｌ２０１３ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ３９２~３９６ 研究论文 ＤＯＩ:１０.３７２４/ ＳＰ.Ｊ.１１２３.２０１２.１００３６ 分子印迹整体柱富集￣高效液相色谱法测定 植物中的痕量细胞分裂素 ∗ 孙　 林ꎬ　 杜甫佑 ꎬ　 阮贵华ꎬ　 黄绎嘉 (桂林理工大学化学与生物工程学院ꎬ广西 桂林 ５４１００４) 摘要:采用分子印迹整体柱富集￣高效液相色谱法选择性分离分析了植物样品中痕量细胞分裂素的含量ꎮ 结果表 明ꎬ以激动素为模板分子ꎬ甲基丙烯酸(ＭＡＡ)为功能单体ꎬ乙二醇二甲基丙烯酸酯(ＥＧＤＭＡ)为交联剂ꎬ甲苯与十 二醇为致孔剂ꎬ可在不锈钢柱管中原位聚合制备激动素分子印迹整体柱ꎻ与非分子印迹整体柱对比ꎬ该分子印迹整 体柱能选择性富集４种细胞分裂素ꎬ具有较好的重复性和高的萃取效率ꎻ在优化的实验条件下ꎬ激动素(Ｋ)、激动素 核苷(ＫＲ)、反式￣玉米素(ｔＺ)和ｍｅｔａ￣ｔｏｐｏｌｉｎ(ｍＴ)的平均加标回收率分别为９１９％、８００％、８７５％ 和５０２％ꎬ相对 标准偏差均小于１１８％ꎮ 本方法已成功地用于不同植物样品中４种细胞分裂素的分离和分析ꎮ 关键词:分子印迹整体柱ꎻ高效液相色谱ꎻ细胞分裂素ꎻ植物ꎻ样品前处理 中图分类号:Ｏ６５８　 　 　 文献标识码:Ａ　 　 　 文章编号:１０００￣８７１３(２０１３)０４￣０３９２￣０５ Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄ ｃｏｌｕｍｎ￣ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ｆｏｒ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｃｅ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎｓ ｉｎ ｐｌａｎｔ ｓａｍｐｌｅｓ ∗ ＳＵＮ ＬｉｎꎬＤＵ Ｆｕｙｏｕ ꎬＲＵＡＮ ＧｕｉｈｕａꎬＨＵＡＮＧＹｉｊｉａ (Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄＢｉｏｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇꎬＧｕｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＧｕｉｌｉｎ５４１００４ꎬＣｈｉｎａ) Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ａ ｍｅｔｈｏｄｂａｓｅｄｏｎ ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄｐｏｌｙｍｅｒ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ (ｍＭＩＰ￣ＨＰＬＣ) ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｃｅ ｃｙｔｏｋｉｎｉｎｓ (ＣＴＫｓ) ｉｎ ｐｌａｎｔ ｓａｍｐｌｅｓ. Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎｔｅｄｐｏｌｙｍｅｒ (ｍＭＩＰ) ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄｉｎ ｓｔａｉｎｌｅｓｓ ｓｔｅｅｌ ｔｕｂｅｂｙ ｕｓｉｎｇ ｋｉｎｅｔｉｎ ａｓ ｔｈｅ ｔｅｍｐｌａｔｅꎬｍｅｔｈａｃｒｙｌｉｃ ａｃｉｄ (ＭＡＡ) ａｓ ｔｈｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｍｏｎｏｍｅｒꎬｅｔｈｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ ｄｉｍｅｔｈａｃｒｙｌａｔｅ (ＥＧＤＭＡ) ａｓ ｔｈｅ ｃｒｏｓｓ￣ｌｉｎｋｅｒꎬａｎｄ ｔｏｌｕｅｎｅ￣ｄｏｄｅｃａｎｏｌ ａｓ ｔｈｅ ｐｏｒｏｇｅｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔｓ. Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｎｏｎ￣ｉｍｐｒｉｎｔｅｄｐｏｌｙｍｅ