先天性长QT间期综合征KVLQT1基因突变分析.pdfVIP

华中科技大学同济医学院 硕士研究生论文 先天性长QT间期综合征KVLQTl基因突变研究 硕士研究生冯 芳 指导老师 张 静 摘要 变情况及临床特征，为早期的基因诊断、分子流行病学调查及将来的基因治 ， 疗提供理论依据。／方法：1．调查2个先天性LQTS家系的发病情况，重点调 【 查病人的临床资料，包括一般情况，晕厥首次出现的时间，晕厥发生的频率 和次数，诱发因素，是否有晕厥和猝死家族史，是否发作尖端扭转性室性心 动过速；记录12导联同步心电图，测量心电图QT长度，计算QTc(根据心率 校正的QT值)；2．收集2个家系所有成员和100例正常对照的外周血，采用 常规酚／氯仿法提取基因DNA；3．设计KVLQTl全部编码区引物，对提取的DNA 进行聚合酶链反应扩增；4．扩增产物在同样条件下进行单链构相多态性分析 和银染色。出现电泳条带的加、减或位置的移动，即说明该样品可能存在着 突变的等位基因；5．对异常的条带进行正反方向的测序，寻找先天性LOTS家 系中KVLQTl基因突变位点；6．将测序结果与公共基因库中的正常序列进行同 源性比对，比较有无单个或多个核苷酸和氨基酸的改变，如证实有氨基酸的 改变，则再连续3次进行聚合酶链反应一单链构相多态性分析一测序，并构建 T载体进行质粒测序，证实其可靠性。结果：1．先天性LQTS女性发病率较男 性高，首发晕厥平均年龄为14．5±5．6岁，紧张及运动是LOTS晕厥的主要诱 因；2．在第一个家系的4名病人中均发现KVLOTI基因G983A的突变，在家系 、的正常人及与该家系无亲缘关系的100例正常人中，均未发现此位点的变异： 、“7 3．国外报导的341位核苷酸热点突变在2个LQTS家系中末被发现≯结论：先 ／ 天性LOTS首发晕厥平均年龄小，青少年时期多发，女性发病率较高，紧张和 华中科技大学同济医学院 硕士研究生论文 上存在与国外不同的突变位点G983A。开展先天性LQTS的基因突变的研究将 有助于先天性LQTS的渗断和治疗，减少漏诊和误诊，增加及时治疗的机会。 关键词： 锾画骧重F黔．—p—一 先天性长QT间期综合征；KVLQTIj基因突变i 雇构相多态性一测序中自天j 一一’～一————_，，—一一 ℃ 华中科技大学同济医学院 硕士研究生论文 of ioninInherited Research Mutat KVLQTl QT Fami LongSyndromely PostgraduateFengFang Tutor： Zhang]ing ABSTRACT the mutationandtheclinical KVLQTl characters Objective：Toidentify inChineseinherited OT can